組織工程概念提出到現在已有20 余年，組織工程研究和產業(yè)化取得了突飛猛進的發(fā)展。隨著研究的不斷深入，理論和技術上遇到的各種問題尚待解答，使得各國需重新思考未來組織工程究竟應該如何發(fā)展。因此，本文回顧國內外組織工程研究和產業(yè)化取得的一些進展，分析組織工程發(fā)展中面臨的問題。根據我國的實際情況并結合國外，特別是美國對發(fā)展組織工程的戰(zhàn)略變化，對我國未來組織工程發(fā)展提出一些具體建議。
目的 綜述生物材料和再生醫(yī)學的研究與進展情況。 方法 廣泛查閱近年有關生物材料及再生醫(yī)學的文獻，總結生物材料的發(fā)展歷程，分析其發(fā)展方向。結果 生物材料經歷了從第一、二代到第三代的發(fā)展過程。再生醫(yī)學是利用人類的自然治愈能力，使受到巨大創(chuàng)傷的機體組織或器官獲得自己再生能力為目的的醫(yī)學，主要包括干細胞與克隆技術、組織工程、組織器官代用品、異種器官移植。 結論 第三代生物材料具有生物活性和降解兩種性能，在植入體內后可促進機體的再生能力，從而達到治療效果。組織工程學提出了復制“組織”、“器官”的思想，為再生醫(yī)學的崛起開辟了道路。
目的 分析醫(yī)用海藻酸基生物材料的研究現況，重點介紹其在臨床領域的應用策略及研究進展，并討論該材料在臨床應用中需關注的重點問題。 方法 基于對國內外醫(yī)用海藻酸基生物材料研究的廣泛調研，并對國內外相關專利、文獻、醫(yī)藥制品進行檢索，綜合分析其研發(fā)、應用現況，提出應重點關注的幾個研究方向。 結果 醫(yī)用海藻酸基生物材料已在臨床廣泛應用，知識產權方面也有多項專利，但集中于創(chuàng)傷敷料和齒科印模領域。心衰治療、栓塞術、組織工程和干細胞培養(yǎng)作為較新的研究點有望成為該領域的發(fā)展新方向。 結論 醫(yī)用海藻酸基生物材料新產品的開發(fā)具有良好的臨床可行性和必要性，但作為新策略、新產品尚需進行大量的應用基礎研究。
目的 探討采用超濾離心法減少重組人脫細胞真皮基質（recombination human acellular dermal matrix，rhADM）樣品浸提液對ELISA 方法檢測牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）殘留量的基質效應。 方 法 清洗rhADM 后，制備rhADM 生理鹽水浸提液。取超濾離心管若干，分別加入1 mg/mL BSA 溶液（預飽和方式1，記作PR1）、10 μg/mL BSA 溶液（預飽和方式2，記作PR2）和rhADM 浸提液2 mL（記作rhADM1 和rhADM2），1 500 × g 離心20 min，重復操作3 次后取出離心管內管，放入未使用的15 mL 離心管中，在PR1 和PR2 管中加入10 μg/mL BSA 溶液4 mL，rhADM 管中加入rhADM 浸提液4 mL，同上法離心后，收集濾液。用ELISA 法測定BSA 含量。計算不同預飽和方式下10 μg/mL BSA 溶液的BSA 回收率（以未經處理的10 μg/mL BSA 溶液作為基礎樣品，分別記作R10 和R20）；計算濾液稀釋倍數的對數與測定吸光度（A）值的相關系數，并與未經超濾離心處理的浸提液檢測結果進行比較。 結果 采用預飽和方式1 處理后，PR1 BSA 濃度為（23.80 ± 1.58）μg/mL，R10 為（9.04 ± 0.24）μg/mL，BSA 回收率為263.4% ±16.9%。采用預飽和方式2 處理后，PR2 BSA 濃度為（8.64 ± 0.24）μg/mL，R20 為（8.12 ± 1.01） μg/ mL，BSA 的回收率為106.5% ± 3.0%。預飽和方式2 的回收率符合檢測要求。不同預飽和方式下BSA 回收率差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.01）。經超濾離心處理后，濾液稀釋倍數的對數與A 值之間的相關性明顯提高，相關系數由 — 0.727 提高至 — 0.960。超濾處理后的相關系數符合檢測要求。 結論 超濾離心處理可以有效減少rhADM 樣品浸提液的基質效應對BSA 殘留量檢測的影響；樣品浸提液自身對超濾離心管的預飽和處理，可得到較為理想的BSA 回收率。
目的總結生物源組織工程支架材料的研究進展，結合臨床應用及產品研發(fā)現況討論該行業(yè)的發(fā)展瓶頸及應對策略。 方法基于對生物源組織工程支架材料研究和應用的廣泛調研，綜合分析其研發(fā)、應用現況，對該領域的研究、產品開發(fā)等現況進行剖析。 結果生物衍生材料、脫細胞基質以及細胞外基質等生物源組織工程支架材料在研究、產業(yè)轉化、臨床應用和監(jiān)管等領域均已取得長足進步，新方向、新產品、新技術仍在不斷涌現。隨著科學技術不斷進步以及生命科學理論的不斷完善，生物源組織工程支架材料的新方向、新重點仍需進行不斷調整以滿足臨床需求。 結論從產業(yè)轉化可行性而言，脫細胞支架和細胞外基質最有望成為該領域研究和產品開發(fā)的新增長點。
目的 探討人表皮細胞與聚碳酸脂膜構建組織工程表皮模型的方法，建立可用于皮膚刺激試驗的組織工程表皮模型。 方法 應用組織工程方法，以聚碳酸脂膜為支架，以人皮膚角質形成細胞為細胞來源，構建組織工程表皮模型。氣液面培養(yǎng)13 d，通過HE 染色、角蛋白10（keratin 10，K10）和K13 抗體、K14 抗體、層粘連蛋白抗體、角化細胞交聯外膜蛋白抗體、中間絲相關蛋白抗體免疫熒光染色、透射電鏡觀察組織工程表皮模型組織結構。采用快速滲透試驗方法，SDS 分別作用于培養(yǎng)基中添加脂質物（實驗組）和未添加脂質物（對照組）的組織工程表皮模型18 h，測定組織活性減小50% 所需化學物質的濃度（half maximal inhibitory concentration of a substance，IC50）值。 結果 HE 染色、免疫熒光染色及透射電鏡觀察顯示，構建的組織工程表皮模型分化良好，具有與正常表皮相似的結構：基底膜、棘層、顆粒層和角化層。實驗組和對照組組織工程表皮模型的IC50 值分別為0.183%（6.00 mmol/L）和0.072%（2.36 mmol/L）。 結 論 在聚碳酸酯膜上構建的組織工程表皮模型具有與正常表皮相似的組織結構，并且具有一定的屏障功能。
為了解決當前納米銀抗菌凝膠體外細胞毒性大、用光引發(fā)法制備納米銀時其顆粒尺寸和尺寸分布范圍大的問題，本研究采用了物理交聯法制備殼聚糖凝膠，由于采用泊洛沙姆作為制備納米銀的分散劑，制備出生物相容性更好且抗菌效果良好的納米銀抗菌凝膠。本研究加入泊洛沙姆作為納米銀分散劑以光引發(fā)法制備納米銀，并對制備的納米銀混合液與烘干后顆粒分別進行紫外可見吸收光譜實驗和掃描電鏡（SEM）實驗。研究采用以碳酸氫鈉對凝膠pH值進行調節(jié)的方法形成凝膠，并對其進行pH值測試、凝膠斷面的SEM測試、溶脹率測試、黏度測試、抑菌圈實驗以及體外細胞毒性實驗。測試結果顯示，當以超純水為溶劑時，以泊洛沙姆為分散劑所制備出的納米銀的最大吸收波長為414 nm，平均粒徑約為60 nm，相比于以聚乙烯吡咯烷酮（PVP）為分散劑或以蒸餾水為溶劑時所制備出的納米銀具有更小的粒徑以及更窄的粒徑分布。所制備出的凝膠的pH值介于5.8~6.1之間，呈弱酸性。干燥后的凝膠斷面具有較多孔洞，凝膠的吸水性良好，且黏度適宜，易于涂布于紗布上。此外，所制備出的凝膠在24、18、12 μg/mL的納米銀濃度下具有較好的抑制大腸桿菌與金黃色葡萄球菌的能力，且在納米銀濃度為24 μg/mL以下時均具有良好的生物相容性?；谝陨咸匦?，該納米銀抗菌凝膠有望應用于燒創(chuàng)傷口的治療。