目的 應(yīng)用聽性腦干反應(yīng)（ABR）研究新生兒缺氧缺血性腦?。℉IE）與患兒聽力損害的關(guān)系并輔助判斷腦病預(yù)后。方法 前瞻性收集成都市婦女兒童中心醫(yī)院新生兒科2006年1月～2008年6月住院確診的HIE患兒，檢測患兒的ABR并隨訪3年觀察其預(yù)后，分析HIE嚴(yán)重程度與聽力障礙嚴(yán)重程度的關(guān)系，以及聽力障礙嚴(yán)重程度與預(yù)后的關(guān)系。統(tǒng)計分析采用SPSS 18.0軟件，組間率的比較采用χ2檢驗。結(jié)果 共納入40例HIE患兒，80只耳，其中33例完成3年預(yù)后隨訪。結(jié)果顯示：86.3%的HIE新生兒有聽力障礙，以輕度聽力障礙為主（40.0%）；中、重度HIE較輕度HIE患兒聽力損害更重（連續(xù)校正χ2=7.383，P=0.007）。ABR結(jié)果顯示：輕度HIE以Ⅰ波PL延長或分化不良為主，占78.1%；中-重度HIE以Ⅲ、Ⅴ波PL延長等中樞段異常為主，占95.8%。與聽力閾值≤60 dB患兒比較，聽力閾值gt;60 dB患兒預(yù)后更差（Fisher確切概率P=0.001）。結(jié)論 ABR反映出HIE嚴(yán)重程度與聽力損害程度呈正相關(guān)，聽力損害程度越重的患兒其預(yù)后越差，ABR可用于輔助判斷新生兒HIE的預(yù)后。
摘要:目的:探討卡配因抑制劑3（MDL28170）對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBD)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響。方法:建立新生SD大鼠HIBD模型,治療組于缺養(yǎng)缺血后即刻、2 h、4 h腹腔內(nèi)注射MDL28170,對照組及手術(shù)組同時予生理鹽水。缺氧缺血后24 h用免疫組化方法觀察大腦皮質(zhì)及海馬CA1區(qū)Caspase3 蛋白表達(dá)、TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡,觀察組織病理改變并計算海馬神經(jīng)元死亡數(shù),透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果:缺氧缺血后24 h缺血側(cè)大腦皮質(zhì)及海馬CA1區(qū)Caspase3和TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)較對照組明顯增加,透射電鏡證實有凋亡細(xì)胞;MDL28170可減少陽性細(xì)胞數(shù)量,抑制神經(jīng)元死亡,差異有顯著性(Plt;0.05)。結(jié)論:MDL28170可通過抑制神經(jīng)凋亡而對新生大鼠HIBD具有一定保護(hù)作用。Abstract: Objective: To investigate the effect of (Calpain inhibitor3) MDL28170 on neural apoptosis in a neonatal model of hypoxicischemic brain damage (HIBD). Methods: A neonatal model of HIBD was established, 7dayold SD rats were divided into three groups. The treatment group received MDL28170(ip) at 0 h,2 h,4 h after HI, whereas the other two groups were administered normal saline simultaneously. The expression of caspase3 (by immunohistochemistry), neural apoptosis (by TUNEL) in cortex and hippocampus ipsilateral to the insult were observed 24 h after HI; hippocampal CA1 neural loss and electromicroscopic changes were assessed at the same time. Results: Apoptotic body was observed by electromicroscopy. Caspase3 positive cells and apoptotic cells increased significantly in the ipsilateral cortex and hippocampal CA1 region compared to the control, and MDL28170 reduced the number of positive cells, attenuated CA1 neural loss with significance (Plt;0.05). Conclusion: It is suggested that MDL28170 may protect the brain of neonatal rats after HIBD by suppressing neural apoptosis.
目的 探討缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)與基因系尾型同源盒基因2(CDX2)蛋白在結(jié)直腸腺癌組織中的表達(dá)及其與結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，并且研究HIF-1α與CDX2表達(dá)之間的相關(guān)性。方法 收集62例結(jié)直腸腺癌及20例正常結(jié)直腸組織標(biāo)本,采用免疫組化SABC法檢測標(biāo)本中HIF-1α、CDX2蛋白的表達(dá)，并采用Spearman等級相關(guān)分析分析HIF-1α與CDX2表達(dá)之間的相關(guān)性。結(jié)果 在20例正常結(jié)直腸黏膜組織中HIF-1α及CDX2蛋白表達(dá)陽性率分別為5.0%（1/20）及95.0%（19/20），在62例結(jié)直腸腺癌組織中HIF-1α及CDX2蛋白表達(dá)陽性率分別為62.9%（39/62）及69.4%（43/62），不同組織中蛋白表達(dá)的差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（Plt;0.05）。結(jié)直腸腺癌中，HIF-1α、CDX2蛋白的表達(dá)與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及Dukes分期有關(guān)（Plt;0.05）； Spearman等級相關(guān)分析表明，HIF-1α與CDX2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r=－0.293 2，Plt;0.05）。結(jié)論 HIF-1α表達(dá)上調(diào)、CDX2表達(dá)下調(diào)可能與結(jié)直腸腺癌的發(fā)生有關(guān)，且這兩者間呈負(fù)相關(guān)。HIF-1α可能參與調(diào)控CDX2的表達(dá)，進(jìn)而加速了結(jié)直腸癌的惡性進(jìn)展。
目的 總結(jié)惡性腫瘤細(xì)胞能量代謝的研究進(jìn)展。方法 復(fù)習(xí)相關(guān)資料，就近年來惡性腫瘤細(xì)胞能量代謝的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。結(jié)果 惡性腫瘤具有獨(dú)特的能量代謝特點(diǎn)，缺氧的腫瘤細(xì)胞生長和增殖需要穩(wěn)定的能量來維持代謝。糖的攝取和糖酵解處于增高狀態(tài)是其生物學(xué)特征，葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝對腫瘤細(xì)胞至關(guān)重要，且導(dǎo)致不良的預(yù)后。結(jié)論 研究缺氧誘導(dǎo)相關(guān)基因與腫瘤的關(guān)系將有助于破解能量代謝的機(jī)理，為腫瘤的診斷和治療提供有力的證據(jù)及新的思路和途徑，改善既往的治療策略，給腫瘤患者更合理和個性化的治療。
目的 探討葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)載體（GLUT）-4是否參與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)以及Akt基因轉(zhuǎn)染提高M(jìn)SCs耐缺氧能力是否與GLUT-4易位和表達(dá)有關(guān)。方法 將經(jīng)Akt基因轉(zhuǎn)染和未轉(zhuǎn)染的MSCs均行常氧（5% CO2）和缺氧（94% N2、1%O2和5%CO2）37 ℃孵育8 h。放射同位素法檢測氚標(biāo)-脫氧葡萄糖（3H-G）的攝取量，免疫細(xì)胞化學(xué)染色、Western blot和RT-PCR分別檢測GLUT-4的蛋白質(zhì)和mRNA表達(dá)。結(jié)果 ①缺氧轉(zhuǎn)染組的3H-G攝取量是缺氧非轉(zhuǎn)染組的（1.39±0.13）倍（P＜0.05），但仍低于常氧非轉(zhuǎn)染組（P＜0.05）。②MSCs在常氧或缺氧、Akt基因轉(zhuǎn)染或無轉(zhuǎn)染的條件下均可表達(dá)GLUT-4蛋白。與常氧非轉(zhuǎn)染組比較，缺氧非轉(zhuǎn)染組GLUT-4 mRNA和蛋白的表達(dá)水平明顯降低（P＜0.05）。③與缺氧非轉(zhuǎn)染組比較，缺氧轉(zhuǎn)染組的GLUT-4 mRNA〔（1.756±0.152）倍〕和蛋白〔細(xì)胞總GLUT-4蛋白（1.653±0.312）倍,細(xì)胞膜GLUT-4蛋白（2.041±0.258）倍〕的表達(dá)水平明顯提高（P＜0.05），且GLUT-4蛋白易位明顯； 但與常氧非轉(zhuǎn)染組比較，其GLUT-4 mRNA和蛋白的表達(dá)水平仍較低（P＜0.05）。④MSCs的3H-G攝取量與細(xì)胞膜中GLUT-4蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.415,P=0.001）。結(jié)論 GLUT-4可能參與MSCs的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)，Akt基因提高M(jìn)SCs耐缺氧能力可能與提高GLUT-4的表達(dá)和易位有關(guān)。
目的 評價吸氧和局部增壓對高原缺氧的治療效果。方法 在3992 m海拔高度選取健康男性45 名( 非高原世居, 高原居住時間1 ～2 年) , 隨機(jī)分為吸氧組、單兵增氧呼吸器組、無創(chuàng)通氣組三組。吸氧組采用常規(guī)經(jīng)鼻吸氧, 流量2 L/min; 單兵增氧呼吸器組采用單兵高原增氧呼吸器輔助呼吸; 無創(chuàng)通氣組采用雙水平無創(chuàng)正壓通氣( BiPAP) 輔助呼吸, 吸氣壓力( IPAP) 10 cmH2 O、呼氣壓力( EPAP) 4 cm H2O; 干預(yù)時間均為30 min, 單兵增氧呼吸器組和無創(chuàng)通氣組在受試前30 min 及受試期間均不吸氧。分別測定各組靜息狀態(tài)下和干預(yù)30 min 時的PaO2、PaCO2、SpO2 及心率( HR) 等指標(biāo)。結(jié)果 吸氧組PaO2 從治療前的( 54. 43 ±3. 01) mmHg增高到治療后的( 91. 36 ±10. 99) mmHg( P lt;0. 01) , PaCO2 從( 30. 41 ±1. 51) mm Hg提高到( 32. 56 ±2. 98) mmHg( P lt; 0. 05) ; 無創(chuàng)通氣組PaO2 從治療前的( 53. 30 ±4. 88) mm Hg增高到治療后的( 58. 58 ±5. 05) mm Hg( P lt;0. 01) , PaCO2 從( 28. 74 ±2. 91) mm Hg降低到( 25. 82 ±4. 35) mm Hg( P lt;0. 05) ; 單兵增氧呼吸器組PaO2 從治療前的( 56. 00 ±5. 75) mmHg降低到治療后的( 50. 82 ±5. 40) mm Hg( P lt; 0. 05) , PaCO2 無顯著變化 [ ( 28. 65 ±2. 78) mmHg到( 29. 75 ±3. 89) mmHg, P gt; 0. 05] 。結(jié)論 在3992 m海拔高度, 吸氧及BiPAP 均能顯著提高受試者的PaO2 及SpO2 , 單兵增氧呼吸器對PaO2 及SpO2 無明顯改善作用。
目的 提取SD 大鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞( PASMCs) 并原代培養(yǎng), 為研究肺血管疾病提供體外模型, 研究缺氧對大鼠PASMCs 增殖的影響。方法 組織貼壁法分離大鼠PASMCs, 光鏡觀察細(xì)胞形態(tài)、透射電鏡、α肌動蛋白( α-SM-actin) 細(xì)胞免疫化學(xué)和細(xì)胞免疫熒光法進(jìn)行鑒定。原代培養(yǎng)的PASMCs 分別于常氧和/ 或低氧下培養(yǎng)2、6、12、24 及48 h, 用四甲基偶氮唑鹽( MTT) 比色法和增殖細(xì)胞核抗原( PCNA) 細(xì)胞免疫化學(xué)法檢測細(xì)胞增殖情況。結(jié)果 光鏡下PASMCs 細(xì)胞為長梭形, 呈典型的“峰-谷”狀結(jié)構(gòu)。免疫學(xué)檢測顯示胞漿被染成棕黃色, 陽性率達(dá)96% 以上。透射電鏡下細(xì)胞呈長梭形, 胞漿內(nèi)有密斑、密體和大量肌絲, 細(xì)胞器較少。MTT檢測結(jié)果示各時間點(diǎn)缺氧組PASMCs 吸光度( A值) 均高于相對應(yīng)的常氧組; 與常氧組比較, 低氧組A 值在12 h 時開始增加( P lt;0. 05) , 24 h時增加最顯著( P lt;0. 01) 。與缺氧2 h 組比較, A 值在缺氧12 h開始增高( P lt;0. 05) , 缺氧24 h 增高最顯著( P lt;0. 01) , 而缺氧48 h 與缺氧24 h 基本一致。PCNA 免疫學(xué)結(jié)果與MTT 結(jié)果基本一致。結(jié)論 用組織塊貼壁法提取PASMCs, 簡單易行, 且能得到純度高、穩(wěn)定生長的PASMCs。缺氧可以促進(jìn)PASMCs 的增殖。
目的 探討法洛四聯(lián)癥（TOF）患者圍術(shù)期凝血功能變化及臨床意義，以減少術(shù)后血液系統(tǒng)并發(fā)癥的發(fā)生。 方法 將2005年1月至2008年8月我院收治的65例接受外科手術(shù)治療的TOF患者納入研究（實驗組），選擇同期手術(shù)的65例非紫紺型先天性心臟病患者作為對照（對照組）。檢測兩組患者術(shù)前及手術(shù)后1周的血?dú)狻⒀Ｒ?guī)、血漿凝血酶原時間（PT）、活化部分凝血活酶時間（APTT）、血漿Ⅷ和Ⅸ因子活性，并對各項指標(biāo)術(shù)前、術(shù)后變化情況進(jìn)行分析。 結(jié)果 組內(nèi)比較：術(shù)后7 d實驗組血紅蛋白（Hb)和APTT均低于術(shù)前，動脈血氧分壓(PaO2)、凝血因子Ⅷ和凝血因子Ⅸ均高于術(shù)前，PT變化不明顯。組間比較：實驗組術(shù)前Hb和APTT均高于對照組,PaO2、凝血因子Ⅷ和凝血因子Ⅸ均低于對照組（Plt;0.01）。 結(jié)論 TOF患者術(shù)前存在內(nèi)源性凝血功能障礙，可能是自身凝血功能代償以降低高粘血癥帶來的血栓形成危險，術(shù)后能得到改善，可能與血氧分壓提高有關(guān)。
目的通過建立人心室肌缺氧模型，研究DADLE[delta opioid peptide（D—Ala2，D—Leu5）enkephalin]對心肌的保護(hù)作用。方法15例標(biāo)本均來自體外循環(huán)心臟手術(shù)患者的心肌組織，將其隨機(jī)分成兩組：組1（6例），為單純?nèi)毖?；組2（9例），為缺氧條件下加入DADLE。實驗第一步：兩組均給氧，將心肌條浸浴在連續(xù)充入氧氣的Tyrode’s灌注液中；第二步：組1用氮?dú)獯嫜鯕?、組2氮?dú)饧覦ADLE（10nmool）代替氧氣。在相應(yīng)的刺激頻率下測量心肌收縮力和收縮長度的變化并衡量DADLE的心肌保護(hù)作用。結(jié)果缺氧條件下無論是否給予DADLE，不同刺激頻率下的心肌收縮力和心肌收縮長度都明顯低于給氧狀態(tài)下相應(yīng)值（P〈0．05）；給氧時，如果組1、組2在15、20、30、45、60、90和120次／分刺激頻率下的心肌收縮力和收縮長度為100％，缺氧時組2在相對應(yīng)刺激頻率下心肌收縮力和收縮長度的百分比明顯高于組1，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P〈0．05）。結(jié)論DADLE在缺氧過程中對心肌收縮力和收縮長度有明顯的影響，對心肌有一定的保護(hù)作用。