目的 應(yīng)用聽(tīng)性腦干反應(yīng)（ABR）研究新生兒缺氧缺血性腦病（HIE）與患兒聽(tīng)力損害的關(guān)系并輔助判斷腦病預(yù)后。方法 前瞻性收集成都市婦女兒童中心醫(yī)院新生兒科2006年1月～2008年6月住院確診的HIE患兒，檢測(cè)患兒的ABR并隨訪3年觀察其預(yù)后，分析HIE嚴(yán)重程度與聽(tīng)力障礙嚴(yán)重程度的關(guān)系，以及聽(tīng)力障礙嚴(yán)重程度與預(yù)后的關(guān)系。統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 18.0軟件，組間率的比較采用χ2檢驗(yàn)。結(jié)果 共納入40例HIE患兒，80只耳，其中33例完成3年預(yù)后隨訪。結(jié)果顯示：86.3%的HIE新生兒有聽(tīng)力障礙，以輕度聽(tīng)力障礙為主（40.0%）；中、重度HIE較輕度HIE患兒聽(tīng)力損害更重（連續(xù)校正χ2=7.383，P=0.007）。ABR結(jié)果顯示：輕度HIE以Ⅰ波PL延長(zhǎng)或分化不良為主，占78.1%；中-重度HIE以Ⅲ、Ⅴ波PL延長(zhǎng)等中樞段異常為主，占95.8%。與聽(tīng)力閾值≤60 dB患兒比較，聽(tīng)力閾值gt;60 dB患兒預(yù)后更差（Fisher確切概率P=0.001）。結(jié)論 ABR反映出HIE嚴(yán)重程度與聽(tīng)力損害程度呈正相關(guān)，聽(tīng)力損害程度越重的患兒其預(yù)后越差，ABR可用于輔助判斷新生兒HIE的預(yù)后。
摘要:目的:探討卡配因抑制劑3（MDL28170）對(duì)新生大鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBD)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響。方法:建立新生SD大鼠HIBD模型,治療組于缺養(yǎng)缺血后即刻、2 h、4 h腹腔內(nèi)注射MDL28170,對(duì)照組及手術(shù)組同時(shí)予生理鹽水。缺氧缺血后24 h用免疫組化方法觀察大腦皮質(zhì)及海馬CA1區(qū)Caspase3 蛋白表達(dá)、TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡,觀察組織病理改變并計(jì)算海馬神經(jīng)元死亡數(shù),透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果:缺氧缺血后24 h缺血側(cè)大腦皮質(zhì)及海馬CA1區(qū)Caspase3和TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較對(duì)照組明顯增加,透射電鏡證實(shí)有凋亡細(xì)胞;MDL28170可減少陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量,抑制神經(jīng)元死亡,差異有顯著性(Plt;0.05)。結(jié)論:MDL28170可通過(guò)抑制神經(jīng)凋亡而對(duì)新生大鼠HIBD具有一定保護(hù)作用。Abstract: Objective: To investigate the effect of (Calpain inhibitor3) MDL28170 on neural apoptosis in a neonatal model of hypoxicischemic brain damage (HIBD). Methods: A neonatal model of HIBD was established, 7dayold SD rats were divided into three groups. The treatment group received MDL28170(ip) at 0 h,2 h,4 h after HI, whereas the other two groups were administered normal saline simultaneously. The expression of caspase3 (by immunohistochemistry), neural apoptosis (by TUNEL) in cortex and hippocampus ipsilateral to the insult were observed 24 h after HI; hippocampal CA1 neural loss and electromicroscopic changes were assessed at the same time. Results: Apoptotic body was observed by electromicroscopy. Caspase3 positive cells and apoptotic cells increased significantly in the ipsilateral cortex and hippocampal CA1 region compared to the control, and MDL28170 reduced the number of positive cells, attenuated CA1 neural loss with significance (Plt;0.05). Conclusion: It is suggested that MDL28170 may protect the brain of neonatal rats after HIBD by suppressing neural apoptosis.
目的 探討缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)與基因系尾型同源盒基因2(CDX2)蛋白在結(jié)直腸腺癌組織中的表達(dá)及其與結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，并且研究HIF-1α與CDX2表達(dá)之間的相關(guān)性。方法 收集62例結(jié)直腸腺癌及20例正常結(jié)直腸組織標(biāo)本,采用免疫組化SABC法檢測(cè)標(biāo)本中HIF-1α、CDX2蛋白的表達(dá)，并采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析分析HIF-1α與CDX2表達(dá)之間的相關(guān)性。結(jié)果 在20例正常結(jié)直腸黏膜組織中HIF-1α及CDX2蛋白表達(dá)陽(yáng)性率分別為5.0%（1/20）及95.0%（19/20），在62例結(jié)直腸腺癌組織中HIF-1α及CDX2蛋白表達(dá)陽(yáng)性率分別為62.9%（39/62）及69.4%（43/62），不同組織中蛋白表達(dá)的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05）。結(jié)直腸腺癌中，HIF-1α、CDX2蛋白的表達(dá)與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及Dukes分期有關(guān)（Plt;0.05）； Spearman等級(jí)相關(guān)分析表明，HIF-1α與CDX2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r=－0.293 2，Plt;0.05）。結(jié)論 HIF-1α表達(dá)上調(diào)、CDX2表達(dá)下調(diào)可能與結(jié)直腸腺癌的發(fā)生有關(guān)，且這兩者間呈負(fù)相關(guān)。HIF-1α可能參與調(diào)控CDX2的表達(dá)，進(jìn)而加速了結(jié)直腸癌的惡性進(jìn)展。
目的 總結(jié)惡性腫瘤細(xì)胞能量代謝的研究進(jìn)展。方法 復(fù)習(xí)相關(guān)資料，就近年來(lái)惡性腫瘤細(xì)胞能量代謝的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。結(jié)果 惡性腫瘤具有獨(dú)特的能量代謝特點(diǎn)，缺氧的腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖需要穩(wěn)定的能量來(lái)維持代謝。糖的攝取和糖酵解處于增高狀態(tài)是其生物學(xué)特征，葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝對(duì)腫瘤細(xì)胞至關(guān)重要，且導(dǎo)致不良的預(yù)后。結(jié)論 研究缺氧誘導(dǎo)相關(guān)基因與腫瘤的關(guān)系將有助于破解能量代謝的機(jī)理，為腫瘤的診斷和治療提供有力的證據(jù)及新的思路和途徑，改善既往的治療策略，給腫瘤患者更合理和個(gè)性化的治療。
目的 探討葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)載體（GLUT）-4是否參與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)以及Akt基因轉(zhuǎn)染提高M(jìn)SCs耐缺氧能力是否與GLUT-4易位和表達(dá)有關(guān)。方法 將經(jīng)Akt基因轉(zhuǎn)染和未轉(zhuǎn)染的MSCs均行常氧（5% CO2）和缺氧（94% N2、1%O2和5%CO2）37 ℃孵育8 h。放射同位素法檢測(cè)氚標(biāo)-脫氧葡萄糖（3H-G）的攝取量，免疫細(xì)胞化學(xué)染色、Western blot和RT-PCR分別檢測(cè)GLUT-4的蛋白質(zhì)和mRNA表達(dá)。結(jié)果 ①缺氧轉(zhuǎn)染組的3H-G攝取量是缺氧非轉(zhuǎn)染組的（1.39±0.13）倍（P＜0.05），但仍低于常氧非轉(zhuǎn)染組（P＜0.05）。②MSCs在常氧或缺氧、Akt基因轉(zhuǎn)染或無(wú)轉(zhuǎn)染的條件下均可表達(dá)GLUT-4蛋白。與常氧非轉(zhuǎn)染組比較，缺氧非轉(zhuǎn)染組GLUT-4 mRNA和蛋白的表達(dá)水平明顯降低（P＜0.05）。③與缺氧非轉(zhuǎn)染組比較，缺氧轉(zhuǎn)染組的GLUT-4 mRNA〔（1.756±0.152）倍〕和蛋白〔細(xì)胞總GLUT-4蛋白（1.653±0.312）倍,細(xì)胞膜GLUT-4蛋白（2.041±0.258）倍〕的表達(dá)水平明顯提高（P＜0.05），且GLUT-4蛋白易位明顯； 但與常氧非轉(zhuǎn)染組比較，其GLUT-4 mRNA和蛋白的表達(dá)水平仍較低（P＜0.05）。④MSCs的3H-G攝取量與細(xì)胞膜中GLUT-4蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.415,P=0.001）。結(jié)論 GLUT-4可能參與MSCs的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)，Akt基因提高M(jìn)SCs耐缺氧能力可能與提高GLUT-4的表達(dá)和易位有關(guān)。
目的 評(píng)價(jià)吸氧和局部增壓對(duì)高原缺氧的治療效果。方法 在3992 m海拔高度選取健康男性45 名( 非高原世居, 高原居住時(shí)間1 ～2 年) , 隨機(jī)分為吸氧組、單兵增氧呼吸器組、無(wú)創(chuàng)通氣組三組。吸氧組采用常規(guī)經(jīng)鼻吸氧, 流量2 L/min; 單兵增氧呼吸器組采用單兵高原增氧呼吸器輔助呼吸; 無(wú)創(chuàng)通氣組采用雙水平無(wú)創(chuàng)正壓通氣( BiPAP) 輔助呼吸, 吸氣壓力( IPAP) 10 cmH2 O、呼氣壓力( EPAP) 4 cm H2O; 干預(yù)時(shí)間均為30 min, 單兵增氧呼吸器組和無(wú)創(chuàng)通氣組在受試前30 min 及受試期間均不吸氧。分別測(cè)定各組靜息狀態(tài)下和干預(yù)30 min 時(shí)的PaO2、PaCO2、SpO2 及心率( HR) 等指標(biāo)。結(jié)果 吸氧組PaO2 從治療前的( 54. 43 ±3. 01) mmHg增高到治療后的( 91. 36 ±10. 99) mmHg( P lt;0. 01) , PaCO2 從( 30. 41 ±1. 51) mm Hg提高到( 32. 56 ±2. 98) mmHg( P lt; 0. 05) ; 無(wú)創(chuàng)通氣組PaO2 從治療前的( 53. 30 ±4. 88) mm Hg增高到治療后的( 58. 58 ±5. 05) mm Hg( P lt;0. 01) , PaCO2 從( 28. 74 ±2. 91) mm Hg降低到( 25. 82 ±4. 35) mm Hg( P lt;0. 05) ; 單兵增氧呼吸器組PaO2 從治療前的( 56. 00 ±5. 75) mmHg降低到治療后的( 50. 82 ±5. 40) mm Hg( P lt; 0. 05) , PaCO2 無(wú)顯著變化 [ ( 28. 65 ±2. 78) mmHg到( 29. 75 ±3. 89) mmHg, P gt; 0. 05] 。結(jié)論 在3992 m海拔高度, 吸氧及BiPAP 均能顯著提高受試者的PaO2 及SpO2 , 單兵增氧呼吸器對(duì)PaO2 及SpO2 無(wú)明顯改善作用。
目的 提取SD 大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞( PASMCs) 并原代培養(yǎng), 為研究肺血管疾病提供體外模型, 研究缺氧對(duì)大鼠PASMCs 增殖的影響。方法 組織貼壁法分離大鼠PASMCs, 光鏡觀察細(xì)胞形態(tài)、透射電鏡、α肌動(dòng)蛋白( α-SM-actin) 細(xì)胞免疫化學(xué)和細(xì)胞免疫熒光法進(jìn)行鑒定。原代培養(yǎng)的PASMCs 分別于常氧和/ 或低氧下培養(yǎng)2、6、12、24 及48 h, 用四甲基偶氮唑鹽( MTT) 比色法和增殖細(xì)胞核抗原( PCNA) 細(xì)胞免疫化學(xué)法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況。結(jié)果 光鏡下PASMCs 細(xì)胞為長(zhǎng)梭形, 呈典型的“峰-谷”狀結(jié)構(gòu)。免疫學(xué)檢測(cè)顯示胞漿被染成棕黃色, 陽(yáng)性率達(dá)96% 以上。透射電鏡下細(xì)胞呈長(zhǎng)梭形, 胞漿內(nèi)有密斑、密體和大量肌絲, 細(xì)胞器較少。MTT檢測(cè)結(jié)果示各時(shí)間點(diǎn)缺氧組PASMCs 吸光度( A值) 均高于相對(duì)應(yīng)的常氧組; 與常氧組比較, 低氧組A 值在12 h 時(shí)開(kāi)始增加( P lt;0. 05) , 24 h時(shí)增加最顯著( P lt;0. 01) 。與缺氧2 h 組比較, A 值在缺氧12 h開(kāi)始增高( P lt;0. 05) , 缺氧24 h 增高最顯著( P lt;0. 01) , 而缺氧48 h 與缺氧24 h 基本一致。PCNA 免疫學(xué)結(jié)果與MTT 結(jié)果基本一致。結(jié)論 用組織塊貼壁法提取PASMCs, 簡(jiǎn)單易行, 且能得到純度高、穩(wěn)定生長(zhǎng)的PASMCs。缺氧可以促進(jìn)PASMCs 的增殖。
目的 探討法洛四聯(lián)癥（TOF）患者圍術(shù)期凝血功能變化及臨床意義，以減少術(shù)后血液系統(tǒng)并發(fā)癥的發(fā)生。 方法 將2005年1月至2008年8月我院收治的65例接受外科手術(shù)治療的TOF患者納入研究（實(shí)驗(yàn)組），選擇同期手術(shù)的65例非紫紺型先天性心臟病患者作為對(duì)照（對(duì)照組）。檢測(cè)兩組患者術(shù)前及手術(shù)后1周的血?dú)?、血常?guī)、血漿凝血酶原時(shí)間（PT）、活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）、血漿Ⅷ和Ⅸ因子活性，并對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)術(shù)前、術(shù)后變化情況進(jìn)行分析。 結(jié)果 組內(nèi)比較：術(shù)后7 d實(shí)驗(yàn)組血紅蛋白（Hb)和APTT均低于術(shù)前，動(dòng)脈血氧分壓(PaO2)、凝血因子Ⅷ和凝血因子Ⅸ均高于術(shù)前，PT變化不明顯。組間比較：實(shí)驗(yàn)組術(shù)前Hb和APTT均高于對(duì)照組,PaO2、凝血因子Ⅷ和凝血因子Ⅸ均低于對(duì)照組（Plt;0.01）。 結(jié)論 TOF患者術(shù)前存在內(nèi)源性凝血功能障礙，可能是自身凝血功能代償以降低高粘血癥帶來(lái)的血栓形成危險(xiǎn)，術(shù)后能得到改善，可能與血氧分壓提高有關(guān)。
目的通過(guò)建立人心室肌缺氧模型，研究DADLE[delta opioid peptide（D—Ala2，D—Leu5）enkephalin]對(duì)心肌的保護(hù)作用。方法15例標(biāo)本均來(lái)自體外循環(huán)心臟手術(shù)患者的心肌組織，將其隨機(jī)分成兩組：組1（6例），為單純?nèi)毖酰唤M2（9例），為缺氧條件下加入DADLE。實(shí)驗(yàn)第一步：兩組均給氧，將心肌條浸浴在連續(xù)充入氧氣的Tyrode’s灌注液中；第二步：組1用氮?dú)獯嫜鯕?、組2氮?dú)饧覦ADLE（10nmool）代替氧氣。在相應(yīng)的刺激頻率下測(cè)量心肌收縮力和收縮長(zhǎng)度的變化并衡量DADLE的心肌保護(hù)作用。結(jié)果缺氧條件下無(wú)論是否給予DADLE，不同刺激頻率下的心肌收縮力和心肌收縮長(zhǎng)度都明顯低于給氧狀態(tài)下相應(yīng)值（P〈0．05）；給氧時(shí)，如果組1、組2在15、20、30、45、60、90和120次／分刺激頻率下的心肌收縮力和收縮長(zhǎng)度為100％，缺氧時(shí)組2在相對(duì)應(yīng)刺激頻率下心肌收縮力和收縮長(zhǎng)度的百分比明顯高于組1，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P〈0．05）。結(jié)論DADLE在缺氧過(guò)程中對(duì)心肌收縮力和收縮長(zhǎng)度有明顯的影響，對(duì)心肌有一定的保護(hù)作用。