為減損排斥反應(yīng)性淋巴細(xì)胞克隆，采用異型雙功能試劑SPDP、2-IT連接antiCD4、CD8單克隆抗體與天花粉毒素(TCS)，應(yīng)用Sephacryl S-200分離游離TCS，采用SDS-PAGE電泳及細(xì)胞毒性分析測定合成的免疫毒素的純度和生物學(xué)活性。電泳結(jié)果顯示，連接混合物中含有連接的免疫毒素、游離的單克隆抗體和TCS，Sephacryl S-200可除去游離的TCS。體外，免疫毒素可特異性殺傷大鼠脾細(xì)胞，其作用具有劑量依賴性。由此提示抗CD4、CD8免疫毒素可以誘導(dǎo)免疫無反應(yīng)性。
目的 研究犬臍血間充質(zhì)干細(xì)胞（cbMSC）心肌移植對梗死區(qū)CD4+T、CD8+T淋巴細(xì)胞分布的影響。 方法 取犬臍帶血，密度梯度離心法分離出單個核細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)法擴增間質(zhì)干細(xì)胞；采用隨機數(shù)字表法將成年雄性雜種犬36只分為實驗組和對照組，采用結(jié)扎冠狀動脈左前降支的方法建立急性心肌梗死動物模型；實驗組取第4代細(xì)胞用5-氮雜胞苷誘導(dǎo)72 h，LacZ報告基因標(biāo)記后經(jīng)冠狀動脈移植入犬心臟的梗死區(qū)域，對照組注射等體積的IMDM培養(yǎng)液；采用免疫組織化學(xué)法檢測表達β-gal的移植細(xì)胞以及梗死區(qū)域CD4+T、CD8+T的分布，應(yīng)用Image-Proplus 5.1軟件進行圖象分析。 結(jié)果 異體犬cbMSC移植心肌梗死區(qū)后可長期存活；圖象分析顯示，實驗組移植后第2、4、8周時，CD4+T的累積光密度值（IOD）為44.35±7.03,19.29±4.11和20.27±3.51,CD4+T與CD8+T的IOD比值為0.63±0.12,0.51±0.15和0.66±0.08；對照組CD4+T的IOD值為65.78±10.27,28.02±2.59和2979±6.83， CD4+T與CD8+T的IOD比值為1.28±0.20，1.34±0.09和1.50±0.16，兩組比較實驗組明顯低于對照組。檢測表明，實驗組移植后第2、4、8周時CD8+T的IOD為69.88±7.84，37.80±8.83和30.81±7.42，高于對照組的51.28±10.01，20.87±4.50和19.91±2.87。 結(jié)論 初步的實驗結(jié)果表明，犬cbMSC的同種異體移植能產(chǎn)生免疫耐受，其機制可能與其抑制CD4+T，減少局部浸潤的CD4+T數(shù)量，降低局部CD4+T/CD8+T比值有關(guān)。
目的 探討gamma;-干擾素對人眼組織中共刺激分子及Fas/FasL分子表達的影響。 方法 正常供體人眼9只用于實驗。其中6只眼作視網(wǎng)膜平片，每只眼取12片視網(wǎng)膜平片；分別將視網(wǎng)膜平片放于24孔培養(yǎng)板中，共分為3組，每孔含Dulbecco改良Eagle(DMEM)/F12培養(yǎng)液2 ml，3組gamma;-干擾素（IFN-gamma;）濃度分別為0、200、1000 U/ml；37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(95%O 2，5%CO 2)24h后取出固定，用免疫組織化學(xué)方法檢測各視網(wǎng)膜平片上B7-1、B7-2、Fas/FasL分子的表達。同時取另外3只正常人眼制作視網(wǎng)膜平片做為正常對照組，直接用免疫組織化學(xué)方法檢測平片中上述分子的表達。 結(jié)果 正常人視網(wǎng)膜平片中有FasL分子的表達，但無B7-1、B7-2和Fas分子表達；當(dāng)視網(wǎng)膜平片與IFN-gamma;體外培養(yǎng)后，視網(wǎng)膜中出現(xiàn)B7-1、B7-2和Fas分子的表達，并且FasL分子表達量增多。 結(jié)論 IFN-gamma;可通過誘導(dǎo)共刺激分子及Fas/FasL分子表達參與免疫反應(yīng)的發(fā)生和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，在T淋巴細(xì)胞的激活中起著重要作用。 (中華眼底病雜志, 2006, 22: 117-119)
目的觀察無癥狀和肺功能正常的胸內(nèi)型結(jié)節(jié)病患者2年的預(yù)后。 方法回顧分析2007年7月至2013年11月在廣州呼吸疾病研究所就診的82例胸內(nèi)型結(jié)節(jié)病患者的臨床資料,觀察患者在2年內(nèi)臨床癥狀、肺功能、炎癥指標(biāo)和病理學(xué)的改變,比較病情進展者和自愈者在臨床和病理上的差異。 結(jié)果24個月觀察期間,有26例(31.7%)結(jié)節(jié)病患者部分或全部自愈,32例(39.0%)病情進展惡化,24例(29.3%)病情穩(wěn)定。自愈組和穩(wěn)定組的肺功能第1秒用力呼氣容積(FEV1)自觀察開始至結(jié)束期無明顯差異,但進展組有17.1%出現(xiàn)FEV1下降,73.8%出現(xiàn)用力肺活量(FVC)下降,28.3%出現(xiàn)彌散功能一氧化碳彌散量(DLCO)下降。觀察開始時,進展組患者的腫瘤壞死因子α(TNF-α)高于自愈組和穩(wěn)定組[(173.5±37.8) μg/mL比(102.6±82.7) μg/mL和(131.7±57.9) μg/mL,P＜0.05],進展組患者在觀察結(jié)束時TNF-α水平顯著高于觀察開始時[(229.2±76.7) μg/mL比(173.5±37.8) μg/mL,P＜0.05]。進展組支氣管肺泡灌洗液(BALF)中性粒細(xì)胞比例明顯高于病情自愈組[(10.6±4.6)%比(8.68±5.2)%,P＜0.01]。進展組與自愈組患者的病變肺組織CD4/CD8無顯著差異(P＞0.05)。病情進展組、穩(wěn)定組和自愈組支氣管黏膜非干酪樣肉芽腫陽性率在觀察開始時分別為63.6%、54.9%和58.4%,三組間無顯著差異(P＞0.05),但觀察結(jié)束時進展組明顯高于自愈組和穩(wěn)定組(69.1%比12.7%和36.2%,P＜0.05)。血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)表達陽性率無論是觀察開始時還是結(jié)束時三組間均無顯著差異(P＞0.05)。 結(jié)論無癥狀性結(jié)節(jié)病患者部分病情進展,血TNF-α和BALF中性粒細(xì)胞比例升高可能預(yù)示病情將進展。
目的 探索乳腺浸潤性導(dǎo)管癌微環(huán)境中的 CD4+ T 細(xì)胞比例、CD8+ T 細(xì)胞比例及 p53 基因突變情況，并探討它們與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌預(yù)后的相關(guān)性。 方法 回顧性收集解放軍第 371 中心醫(yī)院于 2010–2012年期間行手術(shù)切除的 85 例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌標(biāo)本，采用免疫組織化學(xué)染色方法檢測腫瘤組織中的 CD4+ T 細(xì)胞比例、CD8+ T 細(xì)胞比例、CD4+/CD8+ T 細(xì)胞比值以及 p53 基因的突變情況。比較不同前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及不同 p53 基因突變情況患者腫瘤組織中上述指標(biāo)的差異，并探索上述指標(biāo)對乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者預(yù)后的影響。 結(jié)果 ① CD4+ T 細(xì)胞比例、CD8+ T 細(xì)胞比例及 CD4+/CD8+ T 細(xì)胞比值與前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系：在腫瘤簇中，與前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組患者比較，前哨淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移組患者的 CD4+ T 細(xì)胞比例及 CD4+/CD8+ T 細(xì)胞比值的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），但前哨淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移組患者的 CD8+ T 細(xì)胞比例較低（P<0.05）；在腫瘤間質(zhì)中，與前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組患者比較，前哨淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移組患者的 CD4+ T 細(xì)胞比例和 CD8+ T 細(xì)胞比例均較低（P<0.05），CD4+/CD8+ T 細(xì)胞比值較高（P<0.05）。② CD4+ T 細(xì)胞比例、CD8+ T 細(xì)胞比例及 CD4+/CD8+ T 細(xì)胞比值與 p53 基因突變的關(guān)系：不管是在腫瘤簇中還是在間質(zhì)內(nèi)，與 p53 基因突變組患者比較，p53 基因未突變組患者的 CD4+ T 細(xì)胞比例及 CD8+ T 細(xì)胞比例均較低（P<0.05），而 CD4+/CD8+ T 細(xì)胞比值均較高（P<0.05）。③ CD8+ T 細(xì)胞浸潤程度和 p53 基因表達與預(yù)后的關(guān)系：CD8+ T 細(xì)胞高浸潤者的預(yù)后較低浸潤者差（P<0.05），p53 基因突變者的預(yù)后較未突變者差（P<0.05）。 結(jié)論 CD4+ T 細(xì)胞比例、CD8+ T 細(xì)胞比例及CD4+/CD8+ T 細(xì)胞比值與前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及 p53 基因突變有相關(guān)性，且 CD8+ T 細(xì)胞比例與 p53 基因突變及乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的預(yù)后有關(guān)。
目的探討術(shù)前外周血 CD4/CD8 比值對冠狀動脈粥樣硬化性心臟?。–AD）患者行非體外循環(huán)下冠狀動脈旁路移植（OPCABG）手術(shù)預(yù)后的評估價值。方法選擇 2016 年 9 月至 2017 年 4 月在我院接受 OPCABG 手術(shù)的 118 例 CAD 患者，其中男 82 例（69.49%）、女 36 例（30.51%），平均年齡（62.74±4.50）歲。以發(fā)生主要不良心血管事件（MACE）為隨訪終點。根據(jù)術(shù)前流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果將患者分為高 CD4/CD8 組（≥1.40，62 例）和低 CD4/CD8 組（<1.40，56 例）。分析 CD4/CD8 比值與 CAD 患者術(shù)后預(yù)后的相關(guān)性，及 CD4/CD8 對術(shù)后發(fā)生 MACE 的預(yù)測價值。結(jié)果隨訪時間 23.25（20.91，24.70）個月，失訪 4 例（3.39%）。21 例（17.80%）患者在隨訪過程中發(fā)生 MACE。Kaplan-Meier 生存曲線分析結(jié)果表明高 CD4/CD8 組術(shù)后 MACE 發(fā)生率高于低 CD4/CD8 組（log-rank χ2=5.797，P=0.02）。校正 Cox 比例風(fēng)險回歸模型分析結(jié)果表明，CD4/CD8 比值（HR=3.103，95%CI 1.557～6.187，P<0.01）是 CAD 患者術(shù)后發(fā)生 MACE 的獨立危險因素。受試者工作特征曲線結(jié)果顯示，曲線下面積為 0.778（95%CI 0.661～0.894，P<0.01），最佳截斷值為 2.24，靈敏度 57.1%，特異度 87.6%。結(jié)論術(shù)前外周血 CD4/CD8 比值對 CAD 患者行 OPCABG 術(shù)后發(fā)生 MACE 具有預(yù)測價值。
目的 探討正常人眼組織(虹膜睫狀體、脈絡(luò)膜、視網(wǎng)膜)中共刺激分子B7-1和B7-2、與凋亡相關(guān)的分子Fas/FasL、人類白細(xì)胞抗原(human leukocyte antigen, HLA)DR及CD68(抗巨噬細(xì)胞抗體)分子的表達及意義。 方法 12只正常供體人眼(死后16～24 h)均來自中山眼科中心眼庫，將6只供體眼組織(虹膜睫狀體、脈絡(luò)膜、視網(wǎng)膜)行常規(guī)冰凍切片，另6只做視網(wǎng)膜平片，分別于各部分眼組織切片及視網(wǎng)膜平片進行免疫組織化學(xué)研究，探討正常人眼組織中B7-1、B7-2、HLA-DR、CD68、Fas/FasL分子的表達。 結(jié)果 人虹膜睫狀體中有B7-2、FasL、CD68、HLA-DR分子的表達；脈絡(luò)膜中有B7-1、FasL、CD68、HLA-DR分子的表達；視網(wǎng)膜中可見HLA-DR、CD68、FasL分子的表達，而無B7-1、B7-2、Fas分子的表達。 結(jié)論 共刺激分子B7-1和B7-2、Fas/FasL及主要組織相溶性復(fù)合體(major histocompatibility complex, MHC-II)類分子在不同人眼組織中的表達不同，這些分子的表達可能對維持人眼組織免疫環(huán)境的穩(wěn)定性起著重要作用。 （中華眼底病雜志，2003，19：109-112）
目的:探討結(jié)直腸癌KAI1/CD82與E－cadherin的表達與預(yù)后的關(guān)系。方法: 采用免疫組化S-P法檢測105例結(jié)直腸癌中KAI1/CD82與E-cadherin的表達。結(jié)果: 74例中5年生存率為48.6%。生存5年以上的KAI1/CD82的陽性表達率(86.11%),明顯高于生存5年以下者(57.89%)(Plt;0.01);而E－cadherin生存5年以上者的陽性表達率(6389%)亦明顯高于生存5年以下者(31.58%)(Plt;0.01%)。結(jié)論:聯(lián)合檢測KAI1/CD82與E-cadherin的表達對臨床判斷結(jié)直腸癌的預(yù)后有重要價值。