目的 探討胃癌組織中第10號(hào)染色體同源缺失性磷酸酶-張力蛋白（PTEN）、Fas/FasL和基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）的表達(dá)及其與胃癌生物學(xué)行為的關(guān)系。方法 選擇臨床及病理資料齊全的胃癌蠟塊標(biāo)本75例，另取正常胃黏膜組織15例作對(duì)照，采用SP免疫組化方法檢測PTEN、Fas/FasL和MMP-2在其中的表達(dá)。采用χ2檢驗(yàn)和相關(guān)分析作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 PTEN、Fas/FasL及MMP-2的表達(dá)與胃癌的浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期及腫瘤的組織分化程度均有關(guān)（Plt;0.05）。PTEN和Fas/FasL的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.401，Plt;0.001），MMP-2與Fas/FasL的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r=－0.720，Plt;0.001），MMP-2與PTEN的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r=－0.336，Plt;0.001）。結(jié)論 胃癌組織中PTEN、Fas/FasL及MMP-2的表達(dá)陽性率可以成為胃癌診斷和預(yù)后的判斷指標(biāo)。
目的 研究FasL基因轉(zhuǎn)染樹突狀細(xì)胞（DC）對(duì)屋塵螨致敏/激發(fā)小鼠氣道炎癥的影響。方法 將FasL基因轉(zhuǎn)染的DC和對(duì)照DC（未轉(zhuǎn)染DC）分別經(jīng)氣管注入屋塵螨致敏/激發(fā)小鼠體內(nèi)，病理切片觀察小鼠肺部炎癥，取支氣管肺泡灌洗液（BALF），行BALF細(xì)胞總數(shù)及分類計(jì)數(shù)，ELISA檢測BALF的白細(xì)胞介素-4（IL-4）、IL-5和g干擾素（IFN-g）水平。結(jié)果 FasL基因轉(zhuǎn)染的DC過繼處理屋塵螨致敏/激發(fā)小鼠，能顯著地減輕致敏/激發(fā)小鼠氣道變應(yīng)性炎癥，減少BALF中細(xì)胞總數(shù)和嗜酸粒細(xì)胞比例，降低BALF中IL-4和IL-5的水平，增高IFN-?水平。結(jié)論 FasL基因轉(zhuǎn)染的DC過繼處理屋塵螨致敏/激發(fā)小鼠能抑制Th2細(xì)胞活化，抑制變應(yīng)性氣道炎癥。
目的 探討重組的人胰島素樣生長因子1( rhIGF-1) 對(duì)COPD 大鼠膈肌凋亡的保護(hù)作用, 并觀察其對(duì)肺功能的影響。方法 45 只雄性Wistar 大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組和干預(yù)組, 每組 15 只。模型組和干預(yù)組大鼠置于煙霧濃度為5% 的密閉熏箱內(nèi)( 每天30 min, 共28 d) , 第1 d 和第 14 d向氣管內(nèi)注射脂多糖200 μg。干預(yù)組大鼠同時(shí)每日皮下注射rhIGF-1( 60 μg /100 g) 1 次, 持續(xù) 28 d。對(duì)照組不予特殊處理。第1、14、28 d 各組隨機(jī)取5 只大鼠處死, 測定各組離體膈肌的重量、細(xì)胞凋亡率、膈肌中Fas 基因及蛋白表達(dá)水平。第28 d 處死前測定各組大鼠的肺功能。結(jié)果 28 d 后模型組和干預(yù)組大鼠分鐘呼氣量( VE ) 、最大呼氣流速( PEF) 、深吸氣量( IC) 、第0. 3 s 用力呼氣容積 ( FEV0. 3 ) 及膈肌質(zhì)量均較對(duì)照組下降( P lt;0. 05) 。干預(yù)組膈肌質(zhì)量、IC 及VE 值高于模型組( P 均lt; 0. 05) , PEF 和FEV0. 3 與模型組比較無顯著差異( P gt; 0. 05) 。第14 和28 d, 干預(yù)組膈肌細(xì)胞凋亡率、 Fas 基因及蛋白表達(dá)均低于模型組( P 均lt;0. 05) , 仍高于對(duì)照組( P 均lt; 0. 05) 。結(jié)論 Fas / FasL 介導(dǎo)的凋亡途徑參與了膈肌凋亡的發(fā)生, rhIGF-1 可能通過干預(yù)Fas / FasL 途徑減少膈肌凋亡, 在一定程度上改善COPD 大鼠的VE 和IC 值。
目的 糖皮質(zhì)激素會(huì)破壞軟骨，通過觀察地塞米松對(duì)人骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞（human articularchondrocytes，HACs）凋亡及Fas/FasL 基因表達(dá)的影響，探討其促進(jìn)HACs 凋亡的作用機(jī)制。 方法 取行人工膝關(guān)節(jié)置換的膝骨關(guān)節(jié)炎患者自愿捐贈(zèng)軟骨組織，體外分離培養(yǎng)HACs，取第2 代細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將HACs 分別置于含濃度為0.125、1.25、12.5、25 及50 μg/mL 地塞米松培養(yǎng)液中，培養(yǎng)48 h 后采用MTT 法選擇地塞米松最佳工作濃度進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。將HACs 分別采用最佳工作濃度地塞米松（實(shí)驗(yàn)組）及不含地塞米松培養(yǎng)液（對(duì)照組）培養(yǎng)，0、24、48 h 后行TMRE/Hoechst/Annexin V-FITC/7-AAD 四重染色檢測細(xì)胞凋亡，48 h 后行實(shí)時(shí)定量PCR 檢測Fas/FasL mRNA 表達(dá)，0、24、48 h后行免疫組織化學(xué)染色檢測Fas/FasL 蛋白表達(dá)。 結(jié)果 25 μg/mL 濃度組細(xì)胞抑制率顯著高于50 μg/mL 濃度組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；與其他濃度組比較，差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；選擇25 μg/mL 濃度作為后續(xù)實(shí)驗(yàn)工作濃度。培養(yǎng)0、24、48 h，實(shí)驗(yàn)組HACs 凋亡細(xì)胞百分比分別為5.8% ± 0.3%、27.0% ± 2.6%、36.0% ± 3.1%，呈明顯時(shí)間依賴性（P lt; 0.05）。培養(yǎng)48 h 后實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組Fas mRNA 相對(duì)表達(dá)量分別為（8.93 ± 1.12）× 10—3 及（3.31 ± 0.37）× 10—3，F(xiàn)asLmRNA 相對(duì)表達(dá)量分別為（5.92 ± 0.66）× 10—3 及（2.31 ± 0.35）× 10—3，兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。隨培養(yǎng)時(shí)間延長，實(shí)驗(yàn)組Fas 及FasL 蛋白表達(dá)逐漸增加，且各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 地塞米松可促進(jìn)HACs 細(xì)胞凋亡及上調(diào)凋亡基因Fas/FasL 表達(dá)，為進(jìn)一步探討Fas/FasL 信號(hào)通路在地塞米松促HACs 凋亡中的作用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【摘要】目的探討肝癌、癌旁及正常肝組織中Fas和FasL mRNA表達(dá)水平的變化與肝癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系及其意義。方法應(yīng)用半定量RT-PCR的方法檢測肝癌（40例）、癌旁（40例）及正常肝（25例）組織中Fas及FasL mRNA表達(dá)的相對(duì)含量。結(jié)果正常肝組織、癌旁及肝癌組織中Fas和FasL mRNA表達(dá)的相對(duì)含量分別為0.792±0.039和0.245±0.043、0.857±0.031和0.429±0.035以及0.473±0.047和0.185±0.041。肝癌組織中Fas mRNA表達(dá)的相對(duì)含量明顯低于正常肝組織和癌旁組織（P＜0.05）； 肝癌組織中FasL mRNA表達(dá)的相對(duì)含量亦明顯低于正常肝組織（P＜0.05）和癌旁組織（P＜0.01），但癌旁組織中FasL mRNA表達(dá)的相對(duì)含量高于正常肝組織中的表達(dá)（P＜0.05）。結(jié)論肝癌組織不僅通過低表達(dá)Fas來逃避機(jī)體的免疫監(jiān)視作用，而且還通過癌旁組織FasL的高表達(dá)，使與之接觸的淋巴細(xì)胞(表達(dá)Fas)凋亡，最終使肝癌細(xì)胞逃脫機(jī)體的免疫殺傷作用，得以增殖和轉(zhuǎn)移。
急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征（ALI/ARDS）是指心源性以外的各種肺內(nèi)外致病因素導(dǎo)致的原發(fā)或繼發(fā)的急性、進(jìn)行性呼吸衰竭，其病理改變主要表現(xiàn)為肺上皮及內(nèi)皮細(xì)胞的損傷、炎性浸潤和透明膜形成，并伴有肺間質(zhì)纖維化。臨床表現(xiàn)為以呼吸窘迫、頑固性低氧血癥和非心源性肺水腫為特征的一種急性進(jìn)行性呼吸困難。采用常規(guī)的治療難以糾正其低氧血癥，死亡率高達(dá)60%，嚴(yán)重威脅人們的生命健康[1]。自1967年Ashbaugh及其同事首次描述ALI/ARDS以來，醫(yī)學(xué)研究者進(jìn)行了大量關(guān)于ALI/ARDS發(fā)病機(jī)制及病理生理學(xué)的基礎(chǔ)及臨床研究，但是迄今ALI/ARDS的發(fā)病機(jī)理仍未完全闡明。近年來越來越多的研究提示凋亡因子（Fas/Fas配體，即Fas/FasL）介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡在ALI/ARDS的發(fā)生發(fā)展過程中有著十分重要的作用[2，3]。本文就Fas/FasL的生物學(xué)特性及其在ALI/ARDS發(fā)病機(jī)制中的作用作一綜述。
目的 探討gamma;-干擾素對(duì)人眼組織中共刺激分子及Fas/FasL分子表達(dá)的影響。 方法 正常供體人眼9只用于實(shí)驗(yàn)。其中6只眼作視網(wǎng)膜平片，每只眼取12片視網(wǎng)膜平片；分別將視網(wǎng)膜平片放于24孔培養(yǎng)板中，共分為3組，每孔含Dulbecco改良Eagle(DMEM)/F12培養(yǎng)液2 ml，3組gamma;-干擾素（IFN-gamma;）濃度分別為0、200、1000 U/ml；37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(95%O 2，5%CO 2)24h后取出固定，用免疫組織化學(xué)方法檢測各視網(wǎng)膜平片上B7-1、B7-2、Fas/FasL分子的表達(dá)。同時(shí)取另外3只正常人眼制作視網(wǎng)膜平片做為正常對(duì)照組，直接用免疫組織化學(xué)方法檢測平片中上述分子的表達(dá)。 結(jié)果 正常人視網(wǎng)膜平片中有FasL分子的表達(dá)，但無B7-1、B7-2和Fas分子表達(dá)；當(dāng)視網(wǎng)膜平片與IFN-gamma;體外培養(yǎng)后，視網(wǎng)膜中出現(xiàn)B7-1、B7-2和Fas分子的表達(dá)，并且FasL分子表達(dá)量增多。 結(jié)論 IFN-gamma;可通過誘導(dǎo)共刺激分子及Fas/FasL分子表達(dá)參與免疫反應(yīng)的發(fā)生和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，在T淋巴細(xì)胞的激活中起著重要作用。 (中華眼底病雜志, 2006, 22: 117-119)
目的探討FasL在重癥急性胰腺炎（SAP）大鼠肺泡巨噬細(xì)胞（AM）凋亡機(jī)理中的作用。 方法SD大鼠按數(shù)字表法隨機(jī)分為對(duì)照組、SAP組及氯化釓（GdCl3）組3組，每組16只。SAP模型制成6 h后，經(jīng)支氣管肺泡灌洗獲取AM。取右肺下葉行HE染色檢查，透射電鏡觀察和雙染色法檢測AM凋亡情況，用蛋白免疫印跡法（Western blot法）檢測各組AM中FasL蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果GdCl3組電鏡下可見AM典型凋亡形態(tài)學(xué)特征，AM凋亡率為（22.48±1.44）%，明顯高于對(duì)照組〔（11.28±1.01）%〕及SAP組〔（6.86±1.35）%〕，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；GdCl3組FasL蛋白相對(duì)表達(dá)量為（1.230±0.041）%，較對(duì)照組〔（0.936±0.024）%〕和SAP組〔（0.704±0.011）%〕明顯增高（P＜0.05）。AM凋亡率與AM中FasL蛋白表達(dá)水平呈線性正相關(guān)關(guān)系（R2=0.766，P＜0.01）。 結(jié)論GdCl3可能通過激活FasL蛋白表達(dá)誘導(dǎo)SAP大鼠AM發(fā)生凋亡。