目的 探討PLGA- 絲素- 膠原納米三維多孔支架的制備方法及細(xì)胞相容性。 方法 采用靜電紡絲法制備PLGA- 絲素- 膠原（實(shí)驗(yàn)組）及單純PLGA（對(duì)照組）納米三維多孔支架，掃描電鏡觀察兩組支架材料，測(cè)定支架纖維直徑、孔隙率、吸水率及抗拉強(qiáng)度。取8 只SD 近交系乳鼠雙側(cè)臂叢神經(jīng)及坐骨神經(jīng)，分離培養(yǎng)SC，S-100 免疫組織學(xué)觀察并測(cè)定SC 純度。取第4 代SC 以 5 × 104 個(gè)/mL 分別與25%、50% 及100% 濃度的兩組支架浸提液進(jìn)行培養(yǎng)，以DMEM 培養(yǎng)作空白對(duì)照組。培養(yǎng)1、3、5、7 d 采用MTT 法測(cè)定吸光度（A）值。將第4 代SC 以5 × 104 個(gè)/mL 密度分別接種至PLGA- 絲素- 膠原（實(shí)驗(yàn)組）和單純PLGA（對(duì)照組）納米三維多孔支架支架復(fù)合培養(yǎng)。復(fù)合培養(yǎng)2、4、6 d 行掃描電鏡觀察，另于4 d 行激光掃描共聚焦顯微鏡觀察SC 在材料上生長(zhǎng)情況。 結(jié)果 掃描電鏡觀察顯示兩組支架呈相互交聯(lián)的多孔網(wǎng)狀無(wú)紡結(jié)構(gòu)。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組纖維直徑分別為（141 ± 9）nm 和（205 ± 11）nm；支架內(nèi)孔洞相互連通，孔隙率分別為87.4% ± 1.1% 和85.3% ± 1.3%；吸水率分別為2 647% ± 172% 和2 593% ± 161%；抗拉強(qiáng)度分別為（0.32 ± 0.03）MPa 和（0.28 ± 0.04）MPa；兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。S-100 免疫組織化學(xué)染色顯示SC 純度為96.5% ±1.3%。MTT 檢測(cè)SC 在不同濃度實(shí)驗(yàn)組及空白對(duì)照組中生長(zhǎng)良好，A 值均隨時(shí)間延長(zhǎng)而增大，同組各時(shí)間點(diǎn)比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；各時(shí)間點(diǎn)各濃度實(shí)驗(yàn)組及空白對(duì)照組間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。掃描電鏡觀察顯示， 實(shí)驗(yàn)組SC 在支架上生長(zhǎng)良好，4 d 軸突連接，6 d 后大量增殖，基質(zhì)分泌；生長(zhǎng)情況優(yōu)于對(duì)照組。復(fù)合培養(yǎng)4 d 激光掃描共聚焦顯微鏡觀察結(jié)果與掃描電鏡一致。 結(jié)論 采用靜電紡絲方法制備的PLGA- 絲素- 膠原納米三維多孔支架安全無(wú)毒，具備合適的孔徑和孔隙率，適合SC 生長(zhǎng)，細(xì)胞相容性良好，是一種組織工程神經(jīng)良好的支架載體。
目的 探討應(yīng)用SC、ECM 凝膠、bFGF-PLGA 緩釋微球、PLGA 纖維微絲整合至高滲透性聚乳酸[poly（D，L-lacitic acid），PDLLA] 導(dǎo)管中，構(gòu)建組織工程神經(jīng)的方法，并評(píng)價(jià)其修復(fù)周圍神經(jīng)缺損的效果。 方法 培養(yǎng)和純化1 d 齡SD 近交系乳鼠SC，取第1 代細(xì)胞（1 × 107 個(gè)/mL）與bFGF-PLGA 緩釋微球、ECM 凝膠復(fù)合，注入內(nèi)置PLGA纖維微絲的高滲透性PLLDA 導(dǎo)管中，構(gòu)建組織工程神經(jīng)。取成年SD 大鼠60 只，制備坐骨神經(jīng)15 mm 缺損模型后，根據(jù)移植物不同隨機(jī)分為5 組（n=12）。A 組：采用自體神經(jīng)移植修復(fù)；B 組：PDLLA 導(dǎo)管，管內(nèi)注滿PBS 液；C 組：含PLGA纖維微絲的PDLLA 導(dǎo)管，管內(nèi)注滿30%ECM 凝膠；D 組：含PLGA 纖維微絲的PDLLA 導(dǎo)管，管內(nèi)注滿30%ECM 凝膠與SC 的混合物；E 組：組織工程神經(jīng)。術(shù)后觀察大鼠一般情況，于術(shù)后12、16、20 及24 周行坐骨神經(jīng)功能指數(shù)（sciaticfunction index，SFI）測(cè)定，術(shù)后12 及24 周神經(jīng)電生理檢測(cè)，并取材行大體觀察和組織學(xué)觀察。 結(jié)果 術(shù)后大鼠均存活至實(shí)驗(yàn)完成。術(shù)后12、16 周，E 組SFI 與B 組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt; 0.05）；術(shù)后20、24 周，E 組與B、C 組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。術(shù)后12 周，電生理檢測(cè)E 組坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度（nerve conduct velocity，NCV）大于B、C 組（P lt; 0.05），復(fù)合動(dòng)作電位振幅（compound amplitude，AMP）和動(dòng)作電位面積分?jǐn)?shù)（action potential area，AREA）大于B、C 及D 組（P lt;0.05）；術(shù)后24 周，E 組NCV、AMP 和AREA 大于B、C 組（Plt; 0.05）。組織學(xué)觀察術(shù)后12 周，E 組再生神經(jīng)組織面積及有髓神經(jīng)纖維數(shù)與A、B、C 組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt; 0.05）；有髓神經(jīng)纖維密度和直徑小于A 組（P lt; 0.05），大于B、C、D 組（P lt; 0.05）。術(shù)后24 周，E 組再生神經(jīng)組織面積大于B 組（P lt; 0.05），有髓神經(jīng)纖維數(shù)與A、B、C 組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05） ；有髓神經(jīng)纖維密度和直徑大于B、C 組（P lt; 0.05）。 結(jié)論 SC、ECM 凝膠、bFGF-PLGA 緩釋微球，PLGA 纖維微絲與高滲透性PDLLA 導(dǎo)管相互整合構(gòu)建的組織工程神經(jīng)修復(fù)神經(jīng)缺損后，能促近神經(jīng)再生，修復(fù)效果接近于自體神經(jīng)移 植。
目的 探討鹿茸多肽局部給藥和鹿茸多肽-PLGA 復(fù)合膜對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)損傷后神經(jīng)再生的影響。 方法 制備厚度為50 μm、濃度分別為3 mg/g 及15 mg/g 的鹿茸多肽-PLGA復(fù)合膜。取3 ～ 6 月齡Wistar 大鼠72 只，雌雄不限，體重（250 ± 50） g，制備坐骨神經(jīng)切斷模型。模型制備后隨機(jī)分成4 組，每組18 只。A 組：吻合后不作任何處理；B組：術(shù)后每隔1 d 術(shù)側(cè)腓腸肌內(nèi)注射10 mg/L鹿茸多肽1 mL；C組：神經(jīng)吻合口部位包繞3 mg/g 鹿茸多肽-PLGA復(fù)合膜；D 組：神經(jīng)吻合口部位包繞15 mg/g 鹿茸多肽-PLGA 復(fù)合膜。術(shù)后第2、4 及6 周，大體觀察神經(jīng)斷端粘連情況，行電生理檢測(cè)、免疫組織化學(xué)染色及半定量分析、辣根過(guò)氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）逆行示蹤。 結(jié)果 術(shù)后各組大鼠行為無(wú)明顯異常，足底、足趾均無(wú)潰瘍；神經(jīng)吻合口處均無(wú)神經(jīng)瘤形成。術(shù)后2、4 及6 周，A 組神經(jīng)吻合處與周圍組織粘連明顯，B 組僅有輕度粘連，C、D 組無(wú)明顯粘連。術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)小腿三頭肌誘發(fā)電位恢復(fù)率B、C、D 組明顯高于A組（P lt; 0.01），D 組優(yōu)于B 組和C 組（P lt; 0.05）；2、4 周B 組和C 組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05），6 周時(shí)C 組優(yōu)于B 組（P lt;0.05）。再生神經(jīng)纖維軸突及髓鞘TGF-β1、IGF 抗原染色：A 組輕度著色，B、C、D 組隨觀察時(shí)間的延長(zhǎng)著色逐漸加深。各時(shí)間點(diǎn)B、C、D 組TGF-β1、 IGF 抗原表達(dá)均較A 組高（P lt; 0.05）；術(shù)后6 周，D 組與B、C 組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt;0.05），B、C 組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。HRP 逆行示蹤實(shí)驗(yàn)：隨時(shí)間延長(zhǎng)，被標(biāo)記的有髓神經(jīng)纖維逐漸增多，B、C、D 組標(biāo)記陽(yáng)性的有髓神經(jīng)纖維數(shù)明顯高于A 組，D 組高于其他組，B 組和C 組差異不明顯。 結(jié)論 鹿茸多肽局部應(yīng)用和鹿茸多肽-PLGA 復(fù)合膜包繞神經(jīng)吻合口周圍對(duì)神經(jīng)再生均有促進(jìn)作用，此作用與鹿茸多肽有明顯量效關(guān)系，鹿茸多肽-PLGA 復(fù)合膜有預(yù)防神經(jīng)粘連作用。
目的 探討經(jīng)等離子體修飾的PLGA 神經(jīng)導(dǎo)管復(fù)合BMSCs 后修復(fù)大鼠坐骨神經(jīng)缺損的療效。 方 法 取30 只新生SD 大鼠股骨及脛骨骨髓，培養(yǎng)獲得原代BMSCs，并傳至第3 代。將PGA 和PLA 按90 ∶ 10 摩爾比例混合，制備PLGA 神經(jīng)導(dǎo)管，對(duì)其進(jìn)行等離子體修飾。取30 只4 周齡SD 大鼠，制備右后肢坐骨神經(jīng)1 cm缺損模型。按修復(fù)材料不同隨機(jī)分成3 組（n=10），實(shí)驗(yàn)組：第3 代BMSCs 復(fù)合經(jīng)等離子體修飾PLGA 神經(jīng)導(dǎo)管；對(duì)照組：第3 代BMSCs 復(fù)合普通PLGA 神經(jīng)導(dǎo)管；自體組：自體神經(jīng)。術(shù)后6 周觀察大鼠的行走步態(tài)變化，測(cè)定坐骨神經(jīng)功能指數(shù)（sciaticfunction index，SFI）、電生理變化、腓腸肌濕重恢復(fù)率，采用再生神經(jīng)軸突圖像分析評(píng)價(jià)神經(jīng)修復(fù)效果。 結(jié)果 術(shù)后大鼠均存活至實(shí)驗(yàn)完成。術(shù)后6 周，實(shí)驗(yàn)組和自體組大鼠行走步態(tài)恢復(fù)情況較對(duì)照組好。實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組及自體組SFI 分別為— 51.02 ± 6.54、—58.73 ± 7.87 及—48.73 ± 3.95，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。實(shí)驗(yàn)組運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度及波幅明顯高于對(duì)照組（P lt; 0.05），但與自體組差別不明顯（P gt; 0.05），對(duì)照組與自體組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt; 0.01）。實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組及自體組腓腸肌濕重恢復(fù)率分別為56.13% ± 4.27%、43.14% ± 6.52%、59.47% ± 3.85%，組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。實(shí)驗(yàn)組有髓神經(jīng)纖維密度、直徑及髓鞘厚度均高于對(duì)照組（Plt; 0.05），低于自體組（P lt; 0.05）；對(duì)照組與自體組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01）。 結(jié)論 復(fù)合BMSCs 的等離子體PLGA 神經(jīng)導(dǎo)管能有效促進(jìn)周圍神經(jīng)的再生，為研制新型的組織工程神經(jīng)修復(fù)周圍神經(jīng)缺損提供新的思路。
目的:探討PLGA材料構(gòu)建的納米粒載體導(dǎo)入表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)反義寡核苷酸在頭頸鱗癌基因治療中的可行性,為頭頸腫瘤基因治療中載體的選擇提供一個(gè)新的研究思路。方法:以PLGA為材料,采用油包水雙乳化溶劑蒸發(fā)法制備載EGFR正義、反義寡核苷酸納米顆粒;納米顆粒轉(zhuǎn)染SCCⅦ細(xì)胞株;MTT法了解納米顆粒對(duì)細(xì)胞的毒性;通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染后EGFR基因mRNA表達(dá)水平。結(jié)果:獲得了制備載寡核苷酸PLGA納米顆粒工藝流程,PLGA納米顆粒平均粒徑116nm±7.57nm。納米顆粒體外轉(zhuǎn)染SCCⅦ細(xì)胞,MTT結(jié)果顯示納米顆粒對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)無(wú)明顯抑制效應(yīng),同時(shí)具有明顯抑制EGFR基因mRNA表達(dá)效應(yīng)。結(jié)論:PLGA納米顆?？梢杂行У剌d入反義寡核苷酸,達(dá)到抑制靶基因的效果,同時(shí)無(wú)明顯的細(xì)胞毒性。