目的 綜述Wnt/β-catenin及NF-кB信號(hào)通路在椎間盤退變過程中作用機(jī)制的研究進(jìn)展。 方法 查閱Wnt/β-catenin及NF-кB信號(hào)通路在椎間盤退變過程中作用的相關(guān)文獻(xiàn)，并進(jìn)行分析總結(jié)。 結(jié)果 Wnt/β-catenin及NF-кB信號(hào)通路在椎間盤退變過程中均被激活，且存在相互作用，但是它們?cè)谧甸g盤退變過程中的具體作用機(jī)制以及相互作用的中間介質(zhì)尚不清楚。 結(jié)論 Wnt/β-catenin及NF-кB信號(hào)通路在椎間盤退變過程中的作用仍需深入研究。
目的 探討Galectin-3、Fascin-1和β-catenin蛋白在結(jié)直腸腺癌（colorectal carcinoma, CRC）組織中的表達(dá)及其與臨床病理特征的關(guān)系。方法 應(yīng)用微波-EliVisionTM （MW-EliVisionTM）免疫組織化學(xué)染色技術(shù)檢測(cè)60例CRC、30例結(jié)直腸腺瘤和30例正常結(jié)直腸黏膜組織中Galectin-3、Fascin-1和β-catenin蛋白的表達(dá)，分析其與CRC臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果 Galectin-3、Fascin-1和β-catenin蛋白表達(dá)陽(yáng)性率在CRC組織中分別為68.3%（41/60）、53.3%（32/60）和81.7% （49/60）；在腺瘤組織中分別為46.7% （14/30）、30.0% （9/30）和43.3%（13/30）； 在正常黏膜組織中分別為20.0% （6/30）、3.3% （1/30）和13.3% （4/30），三者在三種組織中表達(dá)陽(yáng)性率間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。三者的表達(dá)與CRC 的TNM分期、浸潤(rùn)程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.05, P＜0.01）； Galectin-3和β-catenin蛋白的表達(dá)與CRC分化程度有關(guān)（P＜0.05），而Fascin-1蛋白表達(dá)與CRC分化程度無(wú)關(guān)（P＞0.05）；三者的表達(dá)均與患者年齡、性別及腫瘤大小無(wú)關(guān)（P＞0.05）。 Galectin-3蛋白與Fascin-1和β-catenin蛋白表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.728，P＜0.01；r=0.696，P＜0.01）； β-catenin蛋白與Fascin-1蛋白表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.507，P＜0.01）。結(jié)論 Galectin-3、Fascin-1和β-catenin蛋白在CRC組織中的高表達(dá)與其高侵襲能力和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有一定相關(guān)性，可作為潛在預(yù)測(cè)結(jié)直腸癌浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的指標(biāo)。
目的 檢測(cè)胰腺癌組織中的 CXCR4 和β-catenin的表達(dá)，并探討兩者的相互關(guān)系及其在胰腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移中的臨床意義。方法 應(yīng)用免疫組化SP法對(duì)48例胰腺癌及20例正常胰腺組織中的CXCR4和 β-catenin 蛋白進(jìn)行檢測(cè)，并結(jié)合臨床資料進(jìn)行分析，采用Kaplan-Meier法分析目標(biāo)蛋白的表達(dá)與臨床預(yù)后的關(guān)系，2組間的生存率曲線比較的假設(shè)檢驗(yàn)采用Log-rank法； 多因素分析采用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型。結(jié)果 CXCR4與β-catenin在胰腺癌組織中的表達(dá)陽(yáng)性率分別為85.4%(41/48)和75.0%(36/48)。CXCR4與β-catenin的共表達(dá)率為70.8%（34/48）。CXCR4的陽(yáng)性表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期有關(guān)（P值分別為0.012、0.005），β-catenin的陽(yáng)性表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P=0.047)。Kaplan-Meier生存曲線提示CXCR4陽(yáng)性表達(dá)是胰腺癌預(yù)后差的一個(gè)指標(biāo)。Cox多因素方差分析提示CXCR4、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是影響胰腺癌預(yù)后的獨(dú)立因素。結(jié)論 胰腺癌中 CXCR4 及β-catenin均異常表達(dá)，與胰腺癌的生物學(xué)效應(yīng)密切相關(guān)； CXCR4的異常表達(dá)可能是胰腺癌侵襲、轉(zhuǎn)移的分子機(jī)理之一。
目的 探討Wnt/β-catenin信號(hào)通路在大鼠激素性股骨頭缺血性壞死（steroid-induced avascular necrosis of femoral head，SANFH）中的作用。 方法 12月齡清潔級(jí)雄性SD大鼠72只，體質(zhì)量 200～230 g，隨機(jī)分為對(duì)照組（A組，n=24）、模型組（B組，n=24）和干預(yù)組（C組，n=24）。B、C組大鼠采用脂多糖聯(lián)合甲潑尼龍法制備SANFH模型；C組在第1次注射甲潑尼龍時(shí)開始肌肉注射人重組分泌型卷曲相關(guān)蛋白1（secreted frizzled related protein 1，SFRP1）[1 μg/（kg·d）]，持續(xù)30 d。A組于B組各注射時(shí)間點(diǎn)同法給予等量生理鹽水。觀察B、C組動(dòng)物造模期間以及造模后一般情況。于末次注射甲潑尼龍后2、4、8 周，各組取8只動(dòng)物雙側(cè)股骨頭標(biāo)本行HE染色并計(jì)算空骨陷窩率，TUNEL染色并計(jì)算細(xì)胞凋亡率，免疫組織化學(xué)染色及Western blot 檢測(cè)活性β-catenin、c-Myc表達(dá)情況。 結(jié)果 B、 C組造模期間共6只動(dòng)物死亡，均對(duì)應(yīng)補(bǔ)充；其余動(dòng)物均存活至實(shí)驗(yàn)完成。組織學(xué)觀察示，A組為正常骨組織結(jié)構(gòu)；B、C組隨時(shí)間延長(zhǎng)均出現(xiàn)骨質(zhì)紊亂、骨小梁斷裂等骨壞死表現(xiàn)。各時(shí)間點(diǎn)C組空骨陷窩率及細(xì)胞凋亡率均高于A、B組，B組高于A組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。免疫組織化學(xué)染色及Western blot檢測(cè)示，各時(shí)間點(diǎn)C組活性β-catenin及c-Myc表達(dá)水平均低于A、B組，B組低于A組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。 結(jié)論 Wnt/β-catenin信號(hào)通路異常參與了大鼠SANFH早期病變，作用機(jī)制可能與其調(diào)控c-Myc表達(dá)，導(dǎo)致骨細(xì)胞凋亡有關(guān)。
目的探討白藜蘆醇（resveratrol，RES）對(duì)退變髓核細(xì)胞（nucleus pulposus cells，NPC）細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix，ECM）表達(dá)的調(diào)控作用及其相關(guān)分子機(jī)制。方法選取臨床上接受椎間盤摘除術(shù)的 10 例患者，其中 5 例為年輕脊柱爆裂骨折患者，作為對(duì)照組；余 5 例為老年腰椎間盤突出癥患者，作為退變組。取兩組患者髓核組織，免疫組織化學(xué)染色比較 β-catenin 的原位表達(dá)，Western blot 檢測(cè) β-catenin、Ⅱ型膠原和聚集蛋白聚糖（Aggrecan）蛋白表達(dá)。取退變組髓核組織分離、培養(yǎng) NPC，分別用 IL-1β 單獨(dú)（B 組）或聯(lián)合 RES（C 組）刺激第 3 代 NPC，并設(shè)未刺激細(xì)胞作為空白對(duì)照組（A 組），Western blot 檢測(cè)Ⅱ型膠原和 Aggrecan 蛋白表達(dá)。進(jìn)一步采用小干擾 RNA（small interfering RNA，siRNA）靶向沉默 SIRT1 和 β-catenin 后，采用 Western blot、實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測(cè) β-catenin、SIRT1 蛋白和基因表達(dá)。用完全培養(yǎng)基（1 組）、IL-1β（2 組）、RES+IL-1β（3 組）、SIRT1-siRNA+RES+IL-1β（4 組）刺激第 3 代 NPC 培養(yǎng) 24 h 后，細(xì)胞免疫熒光染色檢測(cè) β-catenin 核轉(zhuǎn)位情況；用完全培養(yǎng)基（Ⅰ組）、IL-1β（Ⅱ組）、IL-1β+β-catenin-siRNA（Ⅲ組）、IL-1β+RES（Ⅳ組）、IL-1β+RES+SIRT1-siRNA（Ⅴ組）刺激第 3 代 NPC 培養(yǎng) 24 h 后，采用 Western blot 檢測(cè)Ⅱ型膠原和 Aggrecan 蛋白表達(dá)。結(jié)果免疫組織化學(xué)染色及 Western blot 檢測(cè)示，與對(duì)照組比較，退變組髓核組織中 β-catenin 陽(yáng)性表達(dá)的細(xì)胞比例顯著升高（t=4.616，P=0.010）；β-catenin 蛋白相對(duì)表達(dá)量顯著升高，Ⅱ型膠原和 Aggrecan 蛋白相對(duì)表達(dá)量顯著下降（P<0.05）。細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，B 組 β-catenin 蛋白相對(duì)表達(dá)量顯著高于 A、C 組，Ⅱ型膠原和 Aggrecan 相對(duì)表達(dá)量顯著低于 A、C 組（P<0.05）。siRNA 轉(zhuǎn)染后，Western blot 檢測(cè)顯示 SIRT1、β-catenin 蛋白表達(dá)顯著降低（P<0.05）。細(xì)胞免疫熒光染色結(jié)果進(jìn)一步提示與 3 組相比，4 組 SIRT1 被 siRNA 沉默后，RES 減弱的 β-catenin 核轉(zhuǎn)位現(xiàn)象加劇。Western blot 檢測(cè)示，Ⅱ組Ⅱ型膠原和 Aggrecan 蛋白表達(dá)較Ⅰ組明顯降低（P<0.05）；Ⅲ組 NPC 轉(zhuǎn)染 β-catenin-siRNA 后，IL-1β 對(duì) ECM 的降解作用被明顯抑制，Ⅱ型膠原和 Aggrecan 蛋白表達(dá)較Ⅱ組明顯升高（P<0.05）；Ⅴ組 NPC 轉(zhuǎn)染 SIRT1-siRNA 后，抑制了 RES 對(duì) ECM 降解的保護(hù)作用，Ⅱ型膠原和 Aggrecan 蛋白表達(dá)較Ⅳ組明顯降低（P<0.05）。結(jié)論RES 可以通過抑制 Wnt/β-catenin 信號(hào)通路維持 NPC ECM 的表達(dá)，為椎間盤退行性疾病的治療提供了新思路。
目的綜述 Wnt 信號(hào)通路在骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，OA）發(fā)生發(fā)展中的活性變化，及其對(duì)軟骨、軟骨下骨的雙靶向調(diào)控和兩者間信息交流對(duì) OA 進(jìn)程的影響和機(jī)制。方法查閱近年在體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究及臨床研究中，OA 和非 OA 狀態(tài)下 Wnt 信號(hào)通路對(duì)關(guān)節(jié)軟骨、軟骨下骨調(diào)控作用及軟骨與軟骨下骨間信息交流的相關(guān)文獻(xiàn)，并對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行分析總結(jié)。結(jié)果Wnt 信號(hào)可通過依賴 β-catenin 的經(jīng)典或不依賴 β-catenin 的非經(jīng)典 Wnt 信號(hào)通路及其與其他信號(hào)通路的交聯(lián)，調(diào)控軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞的分化和功能，進(jìn)而影響軟骨及骨的代謝。過度激活 Wnt 信號(hào)可加重軟骨 OA 樣退變，并且 Wnt 信號(hào)通路可激活下游蛋白 Wnt1 誘導(dǎo)的信號(hào)通路蛋白 1 調(diào)控 OA 進(jìn)展，還可通過軟骨及軟骨下骨中不同細(xì)胞間建立的縫隙連接，直接進(jìn)行分子交流調(diào)控 OA 的發(fā)生發(fā)展。關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射 Wnt 信號(hào)通路抑制劑 SM04690 可以抑制 OA 進(jìn)程；在成骨細(xì)胞中過表達(dá) Wnt 信號(hào)通路抑制劑 Dickkopf 可以拮抗 VEGF 對(duì)軟骨細(xì)胞的作用，并抑制其基質(zhì)的分解代謝。結(jié)論Wnt 信號(hào)通路及其與其他信號(hào)分子的交互作用，可調(diào)控軟骨和軟骨下骨的代謝和功能及兩者間信息交流，因此在 OA 的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用，有望成為 OA 治療的新靶點(diǎn)。
目的探討過表達(dá)低氧誘導(dǎo)因子 1α（hypoxia inducible factor 1α，HIF-1α）對(duì)乳牙牙髓干細(xì)胞（stem cells derived from human exfoliated deciduous teeth，SHED）向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的影響。方法取自愿捐贈(zèng)的健康兒童滯留乳牙，采用膠原酶消化法分離培養(yǎng) SHED 并傳代。取第 3 代細(xì)胞經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)以及成骨誘導(dǎo)分化并茜素紅和 ALP 染色鑒定后，分為空白對(duì)照組（未經(jīng)任何處理）、空載組（感染空載慢病毒）、HIF-1α 過表達(dá)組（感染 HIF-1α 過表達(dá)慢病毒）、Wnt 抑制劑組［經(jīng) Wnt/β-連環(huán)蛋白（β-catenin）信號(hào)通路抑制劑 IWR-1 干預(yù)］和聯(lián)合組（感染 HIF-1α 過表達(dá)慢病毒并經(jīng) IWR-1 干預(yù)），并對(duì)應(yīng)處理。其中，取空白對(duì)照組、空載組及 HIF-1α 過表達(dá)組細(xì)胞采用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 和 Western blot 法檢測(cè) HIF-1α mRNA 和蛋白表達(dá)水平，觀察轉(zhuǎn)染效率。將 5 組細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化 14 d 后，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)記分子血管性血友病因子（von Willebrand factor，vWF）和 CD31 表達(dá)水平；實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測(cè)細(xì)胞中血管細(xì)胞黏附分子 1（vascular cell adhesion protein 1，VACM-1）、VEGF 受體-2 KDR（Kinase-inserted domain containing receptor）和血管內(nèi)皮鈣黏蛋白（VE-cadherin，VE）mRNA 表達(dá)水平；Western blot 法檢測(cè)細(xì)胞中 Wnt/β-catenin 信號(hào)通路相關(guān)蛋白磷酸化糖原合酶激酶 3β（phosphate-glycogen synthasc kinase 3β，p-GSK3β）及 β-catenin 表達(dá)水平；Matrigel 基質(zhì)膠成管實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞體外小管形成情況；DiI 標(biāo)記的乙?；兔芏戎鞍祝―iI-labeled acetylated low density lipoprotein，DiI-Ac-LDL）吞噬實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞吞噬脂質(zhì)能力。結(jié)果經(jīng)鑒定分離得到的細(xì)胞為 SHED。慢病毒轉(zhuǎn)染后，與空白對(duì)照組和空載組比較，HIF-1α 過表達(dá)組 HIF-1α mRNA 和蛋白表達(dá)水平均明顯增加（P<0.05）。向血管內(nèi)皮細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化 14 d 后，與空白對(duì)照組和空載組比較，HIF-1α 過表達(dá)組細(xì)胞中 VCAM-1、KDR 和 VE mRNA 相對(duì)表達(dá)量、vWF 和 CD31 陽(yáng)性細(xì)胞百分比、β-catenin 蛋白相對(duì)表達(dá)量均增加，p-GSK3β 蛋白相對(duì)表達(dá)量降低，細(xì)胞小管形成數(shù)量及吞噬脂質(zhì)能力升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；而 Wnt 抑制劑組各指標(biāo)與 HIF-1α 過表達(dá)組均相反（P<0.05）。與 HIF-1α 過表達(dá)組比較，聯(lián)合組細(xì)胞中 VCAM-1、KDR 和 VE mRNA 表達(dá)水平、vWF 和 CD31 陽(yáng)性細(xì)胞百分比、β-catenin 蛋白相對(duì)表達(dá)量均降低，p-GSK3β 蛋白相對(duì)表達(dá)量升高，細(xì)胞小管形成數(shù)量及吞噬脂質(zhì)能力降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論過表達(dá) HIF-1α 可通過激活 Wnt/β-catenin 信號(hào)通路，促進(jìn) SHED 向血管內(nèi)皮細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化。
目的探究真核起始因子 6（eIF6）的表達(dá)對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移及 Wnt/β-連環(huán)蛋白（Wnt/β-catenin）信號(hào)通路的影響。方法采用免疫組化方法檢測(cè)結(jié)直腸癌組織及其癌旁組織中 eIF6 蛋白的表達(dá)。轉(zhuǎn)染構(gòu)建過表達(dá)/敲低 eIF6 的 SW837 細(xì)胞株，分為對(duì)照組、空質(zhì)粒組、過表達(dá)組和敲低組，采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）和蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù)（WB）檢測(cè)各組 SW837 細(xì)胞中 eIF6 mRNA 和蛋白表達(dá)水平；應(yīng)用 WB 檢測(cè)各組 SW837 細(xì)胞中 Wnt/β-catenin 信號(hào)通路關(guān)鍵因子 β-catenin、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）、后期促進(jìn)復(fù)合體（APC）和通路下游靶基因鋅指轉(zhuǎn)錄因子 SNAI（Snail）以及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）標(biāo)志物 E 型鈣黏蛋白（E-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）的表達(dá)；采用 Transwell 小室和劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組 SW837 細(xì)胞的侵襲和遷移能力；采用皮下成瘤實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組 SW837 細(xì)胞的體內(nèi)成瘤能力并經(jīng)蘇木精伊紅（HE）染色觀察移植瘤病理學(xué)變化。結(jié)果相較于癌旁組織，結(jié)直腸癌組織中 eIF6 蛋白表達(dá)陽(yáng)性率升高（P<0.05）；相較于對(duì)照組，過表達(dá)組 SW837 細(xì)胞 β-catenin、Snail 和 Vimentin 蛋白表達(dá)水平升高，GSK-3β、APC 和 E-cadherin 蛋白表達(dá)水平降低，細(xì)胞遷移侵襲能力和體內(nèi)成瘤能力增強(qiáng)，其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；敲低組 SW837 細(xì)胞 β-catenin、Snail 和 Vimentin 蛋白表達(dá)水平降低，GSK-3β、APC 和 E-cadherin 蛋白表達(dá)水平升高，細(xì)胞遷移侵襲能力和體內(nèi)成瘤能力減弱，其差異也均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論eIF6 可能通過激活 Wnt/β-catenin 信號(hào)通路，從而促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移。
目的研究替米沙坦對(duì)非小細(xì)胞肺癌 A549 細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的影響，并探討其機(jī)制。方法體外培養(yǎng)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株 A549，采用 CCK-8 法檢測(cè)不同濃度替米沙坦對(duì) A549 細(xì)胞增殖活性的影響，以克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同濃度替米沙坦處理下 A549 的存活分?jǐn)?shù)，以劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同濃度替米沙坦對(duì) A549 細(xì)胞遷移能力的影響，Hoechst 染色檢測(cè)不同濃度替米沙坦對(duì) A549 凋亡的影響，用Western blotting 檢測(cè) β-肌動(dòng)蛋白（β-actin）、增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）、Bax、Bcl-2、Wnt-3a、β-連環(huán)蛋白（β-catenin）、絲氨酸蛋白激酶3β（p-GSK-3β）、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）、c-myc 等蛋白的表達(dá)。結(jié)果不同濃度替米沙坦處理抑制了 A549 細(xì)胞增殖活性、克隆形成率和遷移，減少 PCNA 表達(dá)，并且存在濃度依賴性。替米沙坦處理促進(jìn)了 A549 細(xì)胞的凋亡，顯著增加促凋亡蛋白 Bax 和減少抗凋亡蛋白 Bcl-2 的表達(dá)。替米沙坦處理后 A549 細(xì)胞的 Wnt-3a、β-catenin、c-myc、p-GSK-3β 的表達(dá)減少，GSK-3β 的表達(dá)增加。結(jié)論替米沙坦可能在非小細(xì)胞肺癌 A549 細(xì)胞的增殖、遷移和凋亡中起到作用，抑制 Wnt/β-catenin 信號(hào)通路可能是其中的一個(gè)機(jī)制。
目的探討bFGF及EGF單獨(dú)或聯(lián)合誘導(dǎo)人BMSCs（human BMSCs，hBMSCs）向神經(jīng)細(xì)胞分化的差異以及Wnt/β-catenin信號(hào)通路在分化過程中的調(diào)控作用。方法 取鑒定后的第4代hBMSCs，根據(jù)不同誘導(dǎo)條件分為對(duì)照組（A組）、EGF誘導(dǎo)組（B組）、bFGF誘導(dǎo)組（C組）、EGF+bFGF誘導(dǎo)組（D組）以及EGF+bFGF+ Dickkopf相關(guān)蛋白1（Dickkopf-related protein 1，DKK-1）誘導(dǎo)組（E組）。誘導(dǎo)培養(yǎng)7 d后，采用倒置熒光相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，RT-PCR檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞 ［巢蛋白（Nestin）、神經(jīng)元特異性烯醇化酶 （neuron-specific enolase，NSE）、微管相關(guān)蛋白 2（microtubule-associated protein 2，MAP-2）和膠質(zhì)纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）］ 以及Wnt/β-catenin信號(hào)通路關(guān)鍵組件（β-catenin和Cyclin D1）基因水平表達(dá)變化，細(xì)胞免疫熒光染色以及Western blot檢查檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞（Nestin、GFAP）以及Wnt/β-catenin信號(hào)通路關(guān)鍵組件 ［β-catenin、磷酸化β-catenin（phosphorylation β-catenin，P-β-catenin）、細(xì)胞胞質(zhì)β-catenin（Cytoplasmic β-catenin）及細(xì)胞核內(nèi)β-catenin（Nuclear β-catenin）］ 蛋白水平表達(dá)變化。結(jié)果 誘導(dǎo)培養(yǎng)后，與A、B組比較，C～E組細(xì)胞出現(xiàn)典型的神經(jīng)樣細(xì)胞變化，其中D組最明顯。RT-PCR檢測(cè)示與A組比較，C～E組Nestin、NSE、MAP-2，D、E組GFAP及B組NSE基因相對(duì)表達(dá)量升高；C、D組β-catenin以及B～D組Cyclin D1基因相對(duì)表達(dá)量升高；差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。D組與E組比較，Nestin、NSE、MAP-2、GFAP、β-catenin、CyclinD1基因相對(duì)表達(dá)量均升高；與C組比較Nestin基因相對(duì)表達(dá)量下降，NSE、MAP-2、GFAP基因相對(duì)表達(dá)量均升高；組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。細(xì)胞免疫熒光染色觀察示C～E組NSE、GFAP陽(yáng)性率與A組比較均升高，D組高于C、E組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Western blot檢測(cè)示，C、D組NSE蛋白相對(duì)表達(dá)量較A組升高，D組高于C、E組；C～E組GFAP蛋白相對(duì)表達(dá)量較A組升高、D組高于E組；差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。C、D組與A組比較以及D組與E組比較，β-catenin、Cytoplasmic β-catenin、Nuclear β-catenin蛋白相對(duì)表達(dá)量以及β-catenin核質(zhì)比均升高，P-β-catenin蛋白相對(duì)表達(dá)量下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論bFGF可誘導(dǎo)hBMSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化，而EGF無(wú)此作用，但能增強(qiáng)bFGF誘導(dǎo)作用；Wnt/β-catenin信號(hào)通路在這一過程中發(fā)揮正向調(diào)控效應(yīng)。