目的探討Ⅳ型膠原蛋白在乳腺癌中的表達情況及其與臨床病理間的關(guān)系。方法應(yīng)用Ⅳ型膠原蛋白單克隆抗體，采用鏈親和素（LSAB）法檢測93例乳腺惡性腫瘤及5例良性腫瘤組織中Ⅳ型膠原蛋白的表達。結(jié)果Ⅳ型膠原蛋白表達與乳腺癌患者腋窩淋巴結(jié)受累、生存時間及腫瘤大小有關(guān)。Ⅳ型膠原蛋白表達缺乏組5年生存率為29.69%，明顯低于表達完整組的5年生存率（81.43%），P＜0.05； 隨著腫瘤的長大，Ⅳ型膠原表達完整率由53.8%降至10.3%，兩者間呈正相關(guān)（r=0.219）。結(jié)論檢測Ⅳ型膠原在乳腺癌基底膜中的表達狀況，將有助于乳腺癌預(yù)后的判斷及治療方案的制訂。
目的 觀察乳腺良性疾病不典型增生癌變過程中基底膜的變化。 方法采用SP免疫組化染色法和兩種特殊染色方法(Foot及PAS染色法)，并利用電鏡觀察基底膜的變化。 結(jié)果 Ⅱ級不典型增生的乳腺組織已有基底膜的變化，Ⅲ級不典型增生時基底膜的變化更明顯，主要表現(xiàn)為光鏡下基底膜明顯厚薄不均，電鏡下則可見小的缺失，而乳腺癌組織中基底膜完全缺如。結(jié)論 在乳腺上皮細胞癌變過程中基底膜的變化與乳腺上皮細胞的變化密切相關(guān)，是乳腺上皮不典型增生癌變過程的一部分。
【摘 要】 目的 比較不同化學(xué)方法制備去細胞神經(jīng)支架的效果，提供有效的組織工程神經(jīng)支架。 方法 2 月齡雄性SD 大鼠15 只，體重200 ～ 250 g，取雙側(cè)坐骨神經(jīng)，隨機分為3 組，每組10 條。根據(jù)處理方法不同，A 組為正常未處理組；B 組為傳統(tǒng)Sondell 法化學(xué)處理組；C 組為采用Triton X-200、SB-10、SB-16 處理的改良法組。制備后行HE 染色、免疫組織化學(xué)染色及掃描電鏡觀察，并對去細胞程度、脫髓鞘程度及神經(jīng)纖維管道完整性進行量化評價。 結(jié)果 HE 染色：A 組神經(jīng)纖維橫斷面呈圓形，胞核呈深藍色，髓鞘呈網(wǎng)格狀結(jié)構(gòu)；B 組軸突及細胞核均消失，神經(jīng)內(nèi)膜結(jié)構(gòu)破壞明顯；C 組軸突及細胞核均消失，神經(jīng)內(nèi)膜形成不規(guī)則圓形空腔。層粘連蛋白免疫組織化學(xué)染色：A 組基底膜圍繞在髓鞘外周，中間有藍染SC 核；B 組SC 核及髓鞘結(jié)構(gòu)消失，神經(jīng)基底膜結(jié)構(gòu)不完整；C 組SC 核及髓鞘結(jié)構(gòu)消失，神經(jīng)基底膜形成不規(guī)則圓形空腔。S-100 蛋白免疫組織化學(xué)染色：A 組SC 及髓鞘呈棕褐色；B 組及C 組未見明顯髓鞘染色。掃描電鏡觀察：A 組髓鞘、軸突等內(nèi)容物形態(tài)清晰；B 組髓鞘、軸突等結(jié)構(gòu)均消失，基膜管壁排列欠規(guī)則；C 組基膜管壁膠原纖維排列有序。去細胞程度及髓鞘染色深度評分：B、C 組均優(yōu)于A 組（P lt; 0.05），其中髓鞘染色深度評分C 組均優(yōu)于B 組（P lt; 0.05）；神經(jīng)纖維管道完整性評分：C 組優(yōu)于B 組（P lt; 0.05），與A 組相似（P gt; 0.05）；綜合評價去細胞處理方法以C 組方法為佳。 結(jié) 論 改良法所獲得的去細胞神經(jīng)的去細胞效果與傳統(tǒng)Sondell 法相似，而脫髓鞘及組織結(jié)構(gòu)保留的效果優(yōu)于后者，可作為一種新的神經(jīng)支架材料。
目的 尋找最適于組織工程皮膚生長及基底膜構(gòu)建的體外培養(yǎng)基鈣濃度。 方法 按照魯元剛等建立的方法制備復(fù)方殼多糖組織工程皮膚，根據(jù)培養(yǎng)基鈣濃度不同，分為1.00、1.45、1.65和1.95 mmol/L四組。在37℃、5% CO2及90%以上濕度孵箱內(nèi)浸沒培養(yǎng)3 d后，將培養(yǎng)物置于不銹鋼篩網(wǎng)上進行氣液界面三維培養(yǎng)，每天換液1次。培養(yǎng)7、15 d，行HE、PAS染色觀察組織工程皮膚的組織學(xué)特性；并利用免疫組織化學(xué)染色對基底膜的主要成分——Ⅳ型膠原進行觀察，評價基底膜構(gòu)建情況。 結(jié)果 各組組織工程皮膚組織學(xué)觀察類似正常皮膚,有分化良好的表皮和致密真皮，但1.95 mmol/L組表皮分化較其他組更好；1.00、1.45及1.65 mmol/L組角化層外側(cè)常伴未角化的角質(zhì)形成細胞，1.95 mmol/L組表皮細胞角化完全，且與顆粒層細胞結(jié)合牢固。PAS染色顯示各組真、表皮間有紫紅色帶狀結(jié)構(gòu)；免疫組織化學(xué)染色顯示真皮與表皮間Ⅳ型膠原反應(yīng)呈陽性，且1.95 mmol/L組陽性反應(yīng)強于1.00 mmol/L組。 結(jié)論 鈣濃度為1.95 mmol/L的培養(yǎng)基最適合于復(fù)方殼多糖組織工程皮膚生長及基底膜構(gòu)建。
本文對現(xiàn)行生理學(xué)教科書和參考書在闡明人耳傳聲原理中存在的一些問題進行有理有據(jù)的論證, 提出筆者的見解, 彌補文獻不足。運用物理學(xué)的杠桿知識和聲學(xué)理論, 提出錘骨柄的等效簡化模型, 使之符合作為杠桿長臂的要求; 構(gòu)造成一個聽骨鏈組合杠桿, 建立聽骨鏈的等效簡化模型。將此模型分解成兩個簡單杠桿, 在分析論證兩個簡單杠桿的基礎(chǔ)上, 推導(dǎo)出組合等效杠桿的原理公式。通過計算和對比外耳道空氣和內(nèi)耳淋巴液中的聲位移振幅得出結(jié)論:對減少聲位移振幅以適應(yīng)基底膜的承受限度起關(guān)鍵作用的因素是淋巴液的密度和聲速遠比空氣的密度和聲速高。
目的探討人體外泌汗腺組織體外三維培養(yǎng)方法，并對構(gòu)建的三維組織進行形態(tài)學(xué)分析。 方法取整形手術(shù)患者自愿捐贈的正常腹部全層皮膚，經(jīng)Ⅱ型膠原酶消化分離人體外泌汗腺組織，以含5 ng/mL重組人EGF、25 mg/mL牛垂體提取物、100 U/mL青霉素和100 μg/mL鏈霉素的無血清角質(zhì)細胞培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。倒置相差顯微鏡下觀察細胞生長情況。待原代細胞達80%融合后，調(diào)整細胞濃度至1×105個/mL；取0.3 mL細胞懸液與0.3 mL Matrigel基底膜基質(zhì)混勻培養(yǎng)，倒置相差顯微鏡下觀察細胞生長情況。培養(yǎng)14 d后，取標本行冰凍切片，HE染色觀察細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)，免疫組織化學(xué)染色檢測細胞角蛋白7（cytokeratin 7，CK7）和CK19抗原表達。 結(jié)果倒置相差顯微鏡觀察示，經(jīng)Ⅱ型膠原酶消化后大量汗腺組織游離；貼壁后3～5 d長出汗腺細胞，細胞持續(xù)分裂達2～3周，形成圍繞汗腺組織塊的環(huán)狀單層；3～4周后細胞衰老。汗腺細胞接種于Matrigel基底膜基質(zhì)中2～3 d，細胞開始分裂，隨后形成小細胞團、管狀結(jié)構(gòu)以及類球狀結(jié)構(gòu)；約2周時混合培養(yǎng)物開始液化，培養(yǎng)終止。HE染色示部分細胞形成中空管狀結(jié)構(gòu)，管壁由1～2層細胞構(gòu)成，類似于在體汗腺的分泌部和導(dǎo)管部；免疫組織化學(xué)染色見培養(yǎng)的汗腺細胞CK7和CK19表達均呈陽性。 結(jié)論人汗腺細胞接種于Matrigel基底膜基質(zhì)三維培養(yǎng)，形成的組織結(jié)構(gòu)模擬了在體汗腺的組織形態(tài)結(jié)構(gòu)。
血漿置換能夠迅速清除血液循環(huán)中的致病性抗原、抗體以及免疫復(fù)合物等致病因子，已成為自身免疫性疾病重要的輔助治療手段之一。雙重濾過血漿置換作為新型血漿置換模式，由于其受血漿資源的限制少，在免疫性疾病中的使用越來越廣泛。該文報道一例雙重濾過血漿置換成功治療重癥抗腎小球基底膜病的患者，結(jié)合國內(nèi)外文獻進行分析，對雙重濾過血漿置換在常見免疫性疾病中的應(yīng)用進行綜述，以期對雙重濾過血漿置換在臨床中的使用提供參考。