近年隨著廣譜抗生素和免疫抑制劑的使用，侵襲性真菌感染（invasive fungal disease，IFD）的發(fā)病率逐年上升。其中侵襲性曲霉病（invasive aspergillosis，IA）在IFD中比例逐年增高。侵襲性曲霉菌感染在血液科和重癥加強(qiáng)治療病房（ICU）最為常見，其次為呼吸內(nèi)科、感染科和免疫科，IA為免疫功能低下患者致死率高的主要原因，造血干細(xì)胞移植（HSCT）患者中IA的發(fā)病率為2%~26%，在血液病和造血干細(xì)胞移植患者中IA死亡率高達(dá)70.0%~90.0%。造成死亡率高的主要原因是在病程早期不能對IA進(jìn)行可靠診斷，往往使患者延誤治療而死亡。因此，選擇正確、合適的早期診斷方法對疾病的預(yù)后具有決定性意義。傳統(tǒng)的診斷方法如影像學(xué)、真菌直接鏡檢、培養(yǎng)及組織病理學(xué)檢查的敏感性不高，檢出率低，難以用于早期診斷。因此，新的診斷方法對IA的治療至關(guān)重要。血清學(xué)診斷方法是應(yīng)用免疫和生化方法檢測血清或其他體液中的真菌細(xì)胞壁和胞質(zhì)成分，分為抗原和抗體檢查兩類。但由于IFD多繼發(fā)于嚴(yán)重免疫受損患者，往往缺乏可檢測到的抗體，或者抗體的產(chǎn)生變化較大，因此以檢測真菌抗原為主。目前半乳甘露聚糖（GM）和（1→3）-β-D葡聚糖（BG）成為真菌檢查中非常重要的兩個(gè)抗原。
在表皮葡蕩球菌、金黃色扼萄球菌、大腸艾希氏菌、綠膿假單胞菌、白色念珠菌培養(yǎng)液中，按倍比稀釋法加入不同劑雖的幾丁糖溶液，在３７℃恒溫下培養(yǎng)１８小時(shí)。觀察培養(yǎng)液中細(xì)菌生長，得到幾丁糖最小抑菌濃度為：表皮葡蕩球菌０．００８％，金黃色葡蕩球菌０．０１６％，大腸艾希氏菌０．０３２％，綠膿假單胞菌０．０６４％，白色念珠菌１％。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，幾丁糖溶液具有廣譜抗菌作用。
目的 比較羧甲基化葡聚糖（CMD）磁性納米顆粒與脂質(zhì)體LipofectamineTM 2000對人可溶性fms-樣酪氨酸激酶受體-1（sFlt-1）第2～4區(qū)基因片段的轉(zhuǎn)染率。方法 構(gòu)建真核表達(dá)質(zhì)粒編碼增強(qiáng)型綠色熒光蛋白質(zhì)粒（pcDNA3.1-EGFP）/sFlt-1（2～4），采用酶切、電泳及基因測序鑒定。將實(shí)驗(yàn)分為磁顆粒組、脂質(zhì)體組和未轉(zhuǎn)染對照組進(jìn)行。轉(zhuǎn)染后24、48 h，倒置相差熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞綠色熒光分布；流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞綠色熒光表達(dá)率；逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）法和免疫蛋白印跡（Western blot）法檢測sFlt-1(2～4)mRNA和蛋白表達(dá)；噻唑藍(lán)（MTT）比色法觀測細(xì)胞生長情況，計(jì)算各組細(xì)胞相對增長率（RGR）；Hoechst細(xì)胞核染色法觀察各組細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果 重組質(zhì)粒pcDNA3.1/sFlt-1（2～4）酶切產(chǎn)物在瓊脂糖凝膠電泳時(shí)出現(xiàn)大小為915 堿基對的條帶。流式細(xì)胞儀檢測發(fā)現(xiàn)，磁顆粒組平均轉(zhuǎn)染率為45％，脂質(zhì)體組平均轉(zhuǎn)染率21％；二者比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=2.541，P＜0.05）。RT-PCR和Western blot觀察發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)染后48 h磁顆粒組細(xì)胞sFlt-1（2～4） mRNA和蛋白表達(dá)均明顯高于脂質(zhì)體組（t=2.454，2.398；P值均lt;0.05）。轉(zhuǎn)染后24、48 h，磁顆粒組RGR與未轉(zhuǎn)染對照組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.436，P＞0.05），脂質(zhì)體組RGR與未轉(zhuǎn)染對照組及磁顆粒組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=2.412，2.545，P值均lt;0.05）；磁顆粒組細(xì)胞凋亡率與未轉(zhuǎn)染對照組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.436，P＞0.05），與脂質(zhì)體組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=2.236，P＜0.05）。結(jié)論 CMD磁性顆粒較脂質(zhì)體LipofectamineTM 2000可獲得更高的sFlt-1(2～4) 基因片段轉(zhuǎn)染率。
【摘要】 目的 研究肥大細(xì)胞膜穩(wěn)定劑色甘酸二鈉（disordium cromoglycate，DC）對葡聚糖硫酸鈉（dextran sulfate sodium，DSS）誘導(dǎo)的大鼠急性結(jié)腸炎的影響?！》椒ā〕錾?0~100 d的雄性SD清潔級大鼠30只，體重180~250 g。30只大鼠隨機(jī)分為3組:正常對照組（A組）、潰瘍性結(jié)腸炎組（B組）和DC組（C組），每組各10只。B組和C組自由飲用40 g/L DSS溶液（4%） 7 d誘發(fā)急性結(jié)腸炎，同時(shí)C組每天按100 mg/kg腹腔注射DC 1次，A組和B組每天腹腔注射等量的生理鹽水。7 d后，處死各組大鼠。對各組大鼠行疾病活動(dòng)指數(shù)評分，結(jié)腸組織行大體評分、組織學(xué)評分，檢測門靜脈血一氧化氮濃度，結(jié)腸組織髓過氧化物酶活性?！〗Y(jié)果 疾病活動(dòng)指數(shù)評分、大體評分、組織學(xué)評分、一氧化氮濃度及髓過氧化物酶活性均表現(xiàn)為B組gt;C組gt;A組（Plt;0.05）。 結(jié)論 肥大細(xì)胞膜穩(wěn)定劑DC對DSS誘導(dǎo)的大鼠急性結(jié)腸炎有一定的保護(hù)作用?！続bstract】 Objective To observe the influence of the mast cell memebrane stabilizer, disordium cromoglycate (DC), on dextran sulfate sodium (DSS)-induced colitis in rats. Methods Thirty male Sprague-Dawley (SD) rats aged 80 to 100 days with their weight ranged from 180 to 250 g were randomly divided into 3 groups: normal control group (group A), dextran sulfate sodium group (group B) and disordium cromoglycate group (group C), with 10 rats in each. Rats in group B and C drank 40 g/L DSS solution (4%) for 7 days to induce acute colitis. At the same time, intraperitoneal administration of DC (100 mg/kg) to rats in group C was carried out once a day, while the other two groups of rats were given the same amount of normal saline solution. Disease activity index (DAI), gross and histological evaluation were analyzed. NO concentration of blood from portal vein was measured. Myeloperoxidase (MPO) activity of colonic tissue was detected. Results The experimental data of group C, including DAI, gross evaluation, histological assessment, NO concentration and MPO activity, were all significantly higher than those of group A (Plt;0.05), but lower than those of group B (Plt;0.05). Conclusion Disordium cromoglycate can protect the colon of rats with DSS-induced acute colitis.
【摘要】 目的 探討尿路插管所致真菌感染患者的血漿和尿液中1，3-β-D葡聚糖檢測的臨床意義。 方法 將2009年1-5月47例尿路插管所致真菌感染患者設(shè)為試驗(yàn)組，50例正常健康體檢者設(shè)為對照組，分別檢測其血漿和尿液中1，3-β-D葡聚糖的水平。 結(jié)果 試驗(yàn)組與對照組比較，血漿及尿液中1，3-β-D葡聚糖含量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.001）；試驗(yàn)組的尿液和血漿中1，3-β-D葡聚糖含量比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），尿液中的1，3-β-D葡聚糖含量高于血漿。 結(jié)論 血漿和尿液1，3-β-D葡聚糖水平檢測可作為診斷泌尿系統(tǒng)真菌感染的可靠指標(biāo)，且尿液樣本的診斷價(jià)值高于血漿。
目的完全隨機(jī)評價(jià)降鈣素原（PCT）與（1,3）-β-D葡聚糖（G試驗(yàn)）單獨(dú)以及聯(lián)合的情況下診斷肺部感染的實(shí)際價(jià)值。 方法收集2013年1月24日－2014年1月25日1 027例擬診下呼吸道感染患者；統(tǒng)計(jì)痰培養(yǎng)陽性分離菌分布組成；分別以痰涂片及培養(yǎng)和胸部CT為參照對比研究PCT和G試驗(yàn)的診斷價(jià)值；觀察特定條件下PCT分布；研究以痰培養(yǎng)與CT診斷為參照時(shí)G試驗(yàn)值分布；痰培養(yǎng)與血培養(yǎng)結(jié)果相同的單獨(dú)討論；最后，分別評價(jià)PCT與G試驗(yàn)閾值上下4種組合情況下，G試驗(yàn)與PCT聯(lián)合應(yīng)用對肺部曲霉菌及細(xì)菌感染的檢出能力。 結(jié)果病原菌分離以煙曲霉菌、多重耐藥菌、結(jié)核分枝桿菌為主；在疾病時(shí)，PCT為一偏態(tài)分布，中位數(shù)為2.06 ng/mL。PCT單獨(dú)與聯(lián)合痰培養(yǎng)具有相似分布；以痰培養(yǎng)作為參照時(shí)PCT特異度為66.4%，靈敏度為41.2%；在痰培養(yǎng)與CT均診斷為肺曲霉菌感染的病例中，G試驗(yàn)中位數(shù)與均數(shù)均小于臨界值；以痰培養(yǎng)為參照，G試驗(yàn)特異度為84.1%，靈敏度為13.2%；在痰培養(yǎng)與G試驗(yàn)均陽性病例中，G試驗(yàn)中位數(shù)為112.91 pg/mL；以CT為參照，G試驗(yàn)特異度為75.0%，靈敏度為21.4%；痰培養(yǎng)與血培養(yǎng)結(jié)果相同病例中，PCT的中位數(shù)為7.51 pg/mL，3例PCT低于閾值；3例G試驗(yàn)假陽性。在PCT與G試驗(yàn)聯(lián)合診斷評價(jià)中，認(rèn)為同時(shí)陽性不能確認(rèn)，同時(shí)陰性不能排除肺部感染。 結(jié)論對于PCT與G試驗(yàn)測定應(yīng)該謹(jǐn)慎對待，合理分析，綜合評價(jià)后有選擇性地參考。
目的探討p38絲裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）抑制劑在葡聚糖硫酸鈉（DSS）誘導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎大鼠腸道動(dòng)力障礙中的作用。 方法34只Sprague-Dawley大鼠用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分成4組：正常對照組（正常組，n=8），DSS模型組（DSS組，n=8），DSS+生理鹽水（NS）組（DSS+NS組，n=9），DSS+SB203580干預(yù)組（SB203580組，n=9）。除正常組外，所有大鼠每日飲用5% DSS溶液，SB203580組大鼠在飲用5%DSS溶液72 h以后，每天予以SB203580（1 mg/kg體質(zhì)量）進(jìn)行腹腔注射，觀察各組大鼠的疾病活動(dòng)指數(shù)（DAI），以酚紅法測定大鼠結(jié)腸傳輸功能。 結(jié)果①DSS組和DSS+NS組大鼠的DAI評分明顯高于正常組，SB203580組DAI評分明顯降低，但仍然高于正常組（P＜0.05），DSS組和DSS+NS組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。②與正常對照組比較，DSS組和DSS+NS組大鼠的結(jié)腸傳輸功能明顯延遲，經(jīng)SB203580干預(yù)后，其結(jié)腸傳輸功能明顯改善（P＜0.05），DSS組和DSS+NS組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 結(jié)論SB203580能阻斷p38MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，改善DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎癥，從而改善結(jié)腸傳輸功能。
目的采用micro-CT評價(jià)重組人BMP-2/殼聚糖/硫酸葡聚糖（recombinant human BMP-2/ chitosan /dextran sulfate，rhBMP-2/CS/DS）復(fù)合微球誘導(dǎo)異位成骨情況。 方法采用離子交聯(lián)法制作rhBMP-2/CS/DS復(fù)合微球，掃描電鏡觀察其形態(tài)，ELISA法檢測微球體外緩釋效應(yīng)。取6～8周齡雄性SD大鼠48只，隨機(jī)分為4組（n=12）；制備股四頭肌肌袋模型后，分別將相同體積明膠海綿（A組）、CS/DS微球（B組）、rhBMP-2（C組）及rhBMP-2/CS/DS復(fù)合微球（D組）植入肌袋肌間隙中。術(shù)后觀察大鼠一般情況；于4、8、12、16周處死動(dòng)物，取異位骨化組織塊行micro-CT掃描及三維重建，檢測組織骨密度（tissue mineral density，TMD）、骨體積分?jǐn)?shù)（bone volume fraction，BVF）、骨小梁厚度（trabecular thickness，Tb.Th）、骨小梁數(shù)量（trabecular number，Tb.N）、皮質(zhì)骨骨密度（bone mineral density，BMD）及組織礦含量（tissue mineral content，TMC）。 結(jié)果掃描電鏡觀察示，制備的rhBMP-2/CS/DS復(fù)合微球球形較規(guī)整，分散較均勻，無團(tuán)聚，微球表面較光滑；微球體外釋放rhBMP-2于2 h后出現(xiàn)1個(gè)突釋放期，2 d時(shí)達(dá)峰值，釋放周期約20 d。各組大鼠均存活至實(shí)驗(yàn)完成，術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)，A、B組CT掃描均未見放射性顯影，三維重建未發(fā)現(xiàn)成骨；而C、D組放射性顯影強(qiáng)度及三維重建骨組織逐漸增加，且D組強(qiáng)于C組。各時(shí)間點(diǎn)A、B組TMD、BVF、Tb.Th、Tb.N、BMD及TMC均為0。隨時(shí)間延長，C、D組除Tb.N外，其余骨組織參數(shù)均呈總體增加趨勢，各時(shí)間點(diǎn)與A、B組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）；C、D組間4周時(shí)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），8～16周時(shí)D組顯著高于C組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。 結(jié)論rhBMP-2/CS/DS復(fù)合微球異位誘導(dǎo)成骨能力顯著強(qiáng)于單獨(dú)rhBMP-2。
目的評價(jià) 1,3-β-D-葡聚糖檢測（G 試驗(yàn)）對自身免疫性疾病合并侵襲性肺真菌的診斷價(jià)值。 方法回顧性研究鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院 2014 年 1 月至 2016 年 1 月臨床診斷為自身免疫性疾病，在免疫抑制治療過程中合并肺部感染的住院患者 372 例，根據(jù)侵襲性肺部真菌感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)和治療原則（草案）（其中 G 試驗(yàn)不作為診斷標(biāo)準(zhǔn)），分為自身免疫性疾病合并侵襲性肺真菌及自身免疫性疾病合并非侵襲性肺真菌病。自身免疫性疾病合并侵襲性肺真菌病患者分為：確診（18 例），臨床診斷（35 例），擬診（70 例），將確診和臨床診斷患者作為病例組（53 例），自身免疫性疾病合并非侵襲性肺真菌患者作為對照組（249 例），分析兩組 1,3-β-D-葡聚糖的水平及對自身免疫性疾病合并侵襲性肺真菌病的診斷價(jià)值。 結(jié)果自身免疫性疾病合并侵襲性肺真菌患者的 1,3-β-D-葡聚糖水平明顯高于自身免疫性疾病合并非侵襲性肺真菌患者（P<0.05）。應(yīng)用受試者工作特征（ROC）曲線進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn) G 試驗(yàn)對自身免疫性疾病合并侵襲肺真菌患者具有較高的診斷價(jià)值（ROC 曲線下面積為 0.83），在 1,3-β-D-葡聚糖=93.8 pg/ml 時(shí)其診斷的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值分別為 0.65（95% 置信區(qū)間 0.56～0.73）、0.87（95% 置信區(qū)間 0.83～0.92）、0.70（95% 置信區(qū)間 0.64～0.81）、0.83（95% 置信區(qū)間 0.79～0.88）。 結(jié)論G 試驗(yàn)對自身免疫性疾病合并侵襲性肺真菌病的診斷具有重要價(jià)值。
目的 通過影像學(xué)表現(xiàn)評價(jià)硫酸葡聚糖/重組人 BMP-2/殼聚糖（dextran sulfate/recombinant human BMP-2/chitosan，DS/rhBMP-2/CS）緩釋微球聯(lián)合珊瑚羥基磷灰石（coral hydroxyapatite，CHA），修復(fù)大段骨缺損的成骨效果。 方法 取 57 只 24 周齡雄性新西蘭大白兔，制備右橈骨 20 mm 長骨缺損模型。將其中 54 只兔隨機(jī)分為 3 組（n=18），A、B、C 組分別將 CHA、DS/rhBMP-2/CS/CHA 和 rhBMP-2/CHA 人工骨植入骨缺損區(qū)域中；余 3 只兔不植入材料作為空白對照組。術(shù)后觀察動(dòng)物大體情況；術(shù)后 4、8、12 周取材行 X 線片觀察，Micro-CT 掃描及三維重建獲取新生骨體積。 結(jié)果 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物術(shù)后恢復(fù)良好，大體情況正常。X 線片觀察示，B 組術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)骨愈合情況均優(yōu)于 A、C 組；術(shù)后各時(shí)間點(diǎn) B 組 X 線片評分顯著高于 A、C 組（P<0.05）；術(shù)后 8、12 周 C 組評分高于 A 組（P<0.05）。Micro-CT 掃描及三維重建觀察示，術(shù)后各時(shí)間點(diǎn) A 組骨缺損區(qū)新生骨組織少，成骨形態(tài)差；B 組新生骨組織多，骨缺損區(qū)骨塑形良好，12 周時(shí)逐漸接近正常骨形態(tài)；C 組骨缺損區(qū)新生骨組織較多，成骨形態(tài)一般。術(shù)后各時(shí)間點(diǎn) B 組新生骨體積均顯著高于 A、C 組（P<0.05），術(shù)后 8 周 C 組評分高于 A 組（P<0.05）。 結(jié)論 DS/rhBMP-2/CS/CHA 緩釋人工骨的成骨效果明顯優(yōu)于單純 CHA 和 rhBMP-2/CHA，為未來應(yīng)用骨組織工程方法臨床治療骨缺損提供了新思路。